產品名稱 :小鼠神經少突膠質前體細胞
產品特點 :小鼠神經少突膠質前體細胞公司正在出售的產品人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1 人髓母細胞瘤細胞;D341Med 人前列腺癌細胞;PC-3 [PC3] GP120 Others HIV 人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp120 / SU 人細胞裂解液
產品型號 :
更新日期 :2024-12-17
訪問次數 :16
小鼠神經少突膠質前體細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
小鼠神經少突膠質前體分離自腦皮層組織 ;大腦分左右兩個半球 ,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分 ,它是神經元胞體集中的地方 。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質 。少突膠質細胞分布於中樞神經係統 ,在銀浸染標本中 ,少突膠質細胞比星狀膠質細胞小 ,其突起也較小而少 ,呈珠狀 ,故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞 。少突膠質細胞(oligodendrocyte)是中樞神經係統(CNS)的成髓鞘神經膠質細胞 ,其發育要經曆少突膠質細胞祖細胞 、前少突膠質細胞祖細胞 、未成熟和成熟少突膠質細胞等階段 。有學者將少突膠質細胞按其發育程度和形態分為三型 。但是 ,細胞發育是一個連續的過程 ,其形態 、表達產物和功能的演變沒有嚴格的界限 ,因此 ,其分類是相對的 。這三型分別為 :Ⅰ型少突膠質細胞又稱前O2A(pre-O2A progenitor cell) 。細胞呈圓形 ,表麵光滑 ,直徑約3μm ,體外混合培養時成簇生長在星形膠質表麵 ,具有很強的分裂增殖潛力 ,表達GM1 、波形蛋白和多唾液酸—神經粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule ,PSA-NCAM)等 。Ⅱ型少突膠質細胞胞體常有雙極或三極突起 ,極少數為單極突起 ,直徑約7μm ,有一定的分裂增殖能力 。體外培養時為雙潛能細胞 ,既可分化為少突膠質細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質 ,故又稱為少突膠質細胞-Ⅱ型星形膠質祖細胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell ,O2A) 。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達GD3和GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產生GQ的抗體) ,故常用A2B5抗體標記O2A 。Ⅲ型少突膠質細胞不再具有分裂增殖能力 ,為分裂終期細胞 。直徑約10μm 。根據其形成髓鞘的能力 ,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質細胞 。不成熟的OL胞體常伸出4~5條較粗大突起,表麵還殘留有A2B5標記物 ,同時也表達O1-O4抗原 ,無形成髓鞘的能力 。成熟的少突膠質細胞突起有如蜘蛛網 ,大量表達半乳糖腦苷脂(galactocerebro side ,GC) 、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein ,PLP) 、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein ,MBP)等,有對軸突髓鞘化的能力 。體外培養的少突膠質細胞前體細胞(簡稱少突膠質細胞前體細胞)包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質細胞 ,前兩者具有增殖能力 。
產品名稱 | 小鼠神經少突膠質前體細胞 | 組織來源 | 腦組織 |
英文名稱 | Mouse Oligodendrocyte Precursor Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
公司實驗室分離的小鼠神經少突膠質采用消化 、混合細胞營養缺失培養 、搖床振蕩結合差速貼壁法並通過專用培養基培養篩選製備而來 ,細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠神經少突膠質前體經A2B5免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含B-27 Supplement 、PDGF 、bFGF 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 每2天半量換液1次
生長特性 貼壁
細胞形態 雙極 、多極形
傳代特性 不傳代 ,不增值 ,存活1-2周
消化液 0.25%
培養條件 氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
大鼠載脂蛋白E(APOE)檢測試劑盒 ,英文名 : APOE ELISA Kit
Mouse phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)檢測試劑盒
MouseIerleukin9,IL-9ELISAKIT 小鼠白介素9(IL-9)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanfractalkine/CX3CL1ELISAKit人趨化因子
細胞/組織多聚賴載玻片製備試劑盒5次(50至100片)
ELISAKitMMP-9大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B
PREP重組小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白 Protein
鈣非依賴性0脂酶A2(iPLA2)重組蛋白 Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)
MAP1LC3B重組人 LC3B / MAP1LC3B 蛋白 Protein
DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標簽)
CXCL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白
T-細胞免疫調節因子1(TCIRG1)重組蛋白 Recombinant T-Cell, Immune Regulator 1 (TCIRG1)
DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標簽)
AARS重組小鼠 AARS / alanyl-tRNA synthetase 蛋白 Protein
EPCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
CXCL11重組人 I-TAC / CXCL11 蛋白 Protein
小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human prostacycline (PGI) ELISA Kit 人前列環素(PGI)檢測試劑盒
Humanα-Smoothmuscleactin,α-SMAELISAKit 人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAdenovirusIgG,ADV-IgG檢測試劑盒人腺病毒IgG(ADV-IgG)檢測試劑盒規格 :96T/48T
植酸待測樣品處理試劑盒20次
Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2ELISAKit小鼠小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)檢測試劑盒規格 :96T/48T
小鼠神經少突膠質前體細胞小鼠堿性0酸酶 英文名稱 : Mouse Alkaline phosphatase 規格 : 英文縮寫: ALP
小鼠同種異體移植性因子1 英文名稱 : Mouse Allograft Inflamuatory Factor 1 規格 : 英文縮寫 : AIF-1
小鼠血管生成素樣蛋白2 英文名稱 : Mouse Angiopoietin like protein 2 規格 : 英文縮寫 : ANGPTL2
小鼠血管生成素樣蛋白4 英文名稱 : Mouse Angiopoietin Like Protein 4 規格 : 英文縮寫 : ANGPTL4
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