① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：兔骨外膜細胞

英文名稱 ：Rabbit Periosesteum Cells

組織來源 ：骨

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

兔骨外膜分離自骨外膜組織 ；骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外麵包著的那層膜 ；在骨外膜和骨內膜中含有一種能夠生成骨的細胞 ，稱為成骨細胞 ，這種細胞具有使骨骼生長的功能 。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞 ，稱為破骨細胞 。這兩種細胞作用相反又相互依據 。成骨細胞像建築工人 ，不停地生成新的骨組織 ，破骨細胞則像維修工人 ，不停地清除老化 、死亡 、破碎的骨結構 ，並且還負責拆除“違章建築" ，就是除去不需要的多餘的骨組織 ，從而使骨的整體結構更符合生物力學的需要 。正常情況下 ，兩種細胞之間處於動態的平衡之中 ，完成骨的生長發育的新陳代謝 。骨折之後 ，成骨細胞先啟動 ，從而促使新骨痂的生成 ，即骨折的愈合。但是 ，股痂隻是恢複了骨的連續性 ，往往不符合生物力學的需要 ，改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成 。

實驗室分離的兔骨外膜采用膠原酶消化法製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔骨外膜經Vimentin免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養基 ：含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：成纖維細胞樣

傳代特性 ：可傳5代左右 ；3代以內狀態佳

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

兔骨外膜體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠促腎上腺皮質激素(ACTH)檢測試劑盒  ，英文名 ： ACTH ELISA Kit

Mouse 16 alpha hydroxy esone 1 (16- a OHE-1) ELISA Kit 小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)檢測試劑盒

ELISA 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2)  進口分裝

CLIAKitforLIFRELISAKit大鼠白血病抑製因子受體

通用型ECL免疫印跡化學發光溶液A液 ：50毫升B液：50毫升1000cm2

ELISAKit1,3-βDglucosidase雞1,3-βD葡葡糖苷酶

FSTL1重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)

CGB5重組人 CGB5 蛋白 Protein

IFNG Protein Human 重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白

EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白

甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)

IFNG Protein Human 重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白

FSTL1重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白

CGB5重組人 CGB5 蛋白 Protein

小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human gasic inhibitory polypeptide (GIP) ELISA Kit 人胃抑素(GIP)檢測試劑盒

Humancomplexedprostatespecificaigen,cPSAELISAKit 人複合前列腺特異性抗原(CPSA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanC-ReactiveProtein,CRP檢測試劑盒人C反應蛋白(CRP)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

組織CSK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanProtamine1,PRM1ELISAKit人1(PRM1)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

兔骨外膜細胞糖元染液   Pap stain (exfoliated cell staining)

蘇木素染液   Fast HE tissues and exfoliated cells of dye

伊紅染液   Gram stain

H-E染液   Acid fast stain

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用