細胞培養方法 ；
1 、細胞傳代 ：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清 ，用PBS或生理鹽水清洗1-2次 ；
②加入2ml0.25%（T25瓶） ，使覆蓋整個瓶或皿 ，蓋好放入培養箱消化 ；
③1-2min後 ，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落 ，輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化 ；若細胞還是貼壁 ，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止 ；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min ，棄上清 ；
⑤用新鮮培養基重懸後加入培養瓶或皿中 ，T25培養瓶加6-8ml培養基 ；
⑥懸浮細胞直接離心收集 ，細胞沉澱重懸後分到新培養瓶中 。
2 、細胞複蘇 ：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化 ，時間1min左右 ，加入4-5ml培養基混勻 。
②在1000RPM左右條件下離心4min ，棄上清,加1-2ml培養基吹勻 ，將細胞懸液加入培養瓶中 ，補加適量培養基 。
3 、細胞凍存 ：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清 ，用PBS或生理鹽水清洗1-2次 ，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min後 ，顯微鏡下觀察細胞 ，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落 ，輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化 ；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min ，棄上清 ，加1ml凍存液重懸細胞 ；
④將凍存管放入程序降溫盒 ，放入-80℃冰箱 ，4小時後將凍存管轉入液氮罐儲存 。

B16-RFP熒光標記細胞株
B16-GFP熒光標記細胞株
SHG44-LUC熒光標記細胞株
SHG44-RFP熒光標記細胞株
SHG44-GFP熒光標記細胞株
HCT116-LUC熒光標記細胞株
Renca-LUC熒光標記細胞株
BIU87/ADR人膀胱癌耐藥株
HCT-8/FU人結腸癌氟耐藥株
COC1/DDP人卵巢癌耐藥株
BEL/FU人肝癌耐氟細胞株
HCT-8/TAXOL人結腸癌耐藥株
A2780/TAXOL人卵巢癌耐藥株
LOVO/ADR人結腸癌耐藥株
HCT-8/VCR人結腸癌長春新堿耐藥細胞株
PATU8988/FU人胰腺癌氟耐藥株
Hela/TAXOL人宮頸癌耐藥細胞株
Bxpc3/DDP人胰腺腫瘤耐藥株
Hela/DDP人宮頸癌耐藥株
CNE2/DDP人鼻咽癌耐藥株
A375/DDP人惡性黑色素瘤耐藥株
HT-29/DDP人結直腸腺癌耐藥株
SMMC7721/DDP人肝癌耐藥株
SK-MES-1/DDP人肺鱗癌耐藥株
T-24/DDP人膀胱移行細胞癌耐細胞株
A549/DDP人肺癌耐藥株
SGC7901/DDP人胃癌耐藥株
K562/ADR人白血病耐藥株
A549/TAXOL人肺癌耐藥株
MCF7/Taxol人乳腺癌耐藥株

 

上一篇 DR1相關蛋白1抗體的化標記實驗要點 下一篇 雙重輪絲鏈黴菌菌種的培養