的化標記實驗要點：
1.如在反應混合液中有疊氮鈉或遊離氨基存在,會抑製標記反應 。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L緩衝液或0.5mol/L硼酸緩衝液充分透析 ；
2.所用的NHSB及待化蛋白質之間的分子比按蛋白質表麵的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件 ；
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活 ；
4.由於抗體的氨基不易接近可能造成化不足,此時可加入去汙劑如 Triton x-100, Tween20等 ；
5.當遊離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在於抗體的抗原結合位點時,或位於酶的催化位點時,化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性 ；
6.還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基 、巰基 、異咪唑基及基,也可與糖基共價結合 ；
7.交聯反應後,應充分透析,否則,殘餘的會對化抗體與親和素的結合產生競爭作用 ；
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由於鏈黴親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底 。

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