操作流程如下 ：

（1） 兔型纖溶酶原激活物elisa檢測試劑盒僅用於科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl ，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔 ，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl ；另設一個空白對照孔 ，加入純細胞裂解液100μl 。 
（2）酶標板置4℃ ，包被過夜 。
（3）洗板 ：吸幹孔內反應液 ，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔後 ，即甩去） ，之後將洗滌液注滿板孔 ，浸泡1-2分鍾 ，間歇搖動 。甩去孔內液體後在吸水紙上拍幹 。重複洗滌3-4次 。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl ，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl 。 
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內 ，孵育60min 。 
（6）洗板，同（4） 。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl 。 
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內 ，孵育60min 。 
（9）洗板 ，同（4） 。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl ，輕輕混勻10s ，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應 。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2 ，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2） ，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光幹擾 。
（13）數據處理 ：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值後 ，計算S/N值 。S/N≥2.1為陽性判定標準 。

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