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绵羊星状病毒2型RT-LAMP试剂盒反应五要素
：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP

、模板和Mg2+ 引物
： 引物是PCR特异性反应的关键

，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度
。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列
，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度
： 15-30bp
，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳
，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列
。 

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补
，否则会形成引物二聚体
，产生非特异的扩增条带
。

⑤引物3’端的碱基
，特别是zui末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点
，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性
。 

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