老哥俱乐部

细胞简介

：

小鼠胰腺腺泡分离自胰腺组织
；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成
，腺泡分泌胰液
，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有
、原、脂肪酶、等
。胰液通过胰腺管排入十二指肠

，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成
：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞
。α细胞分泌胰高血糖素
，升高血糖
；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌，以旁分泌的方式抑制α
、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动
、胰液分泌和胆囊收缩。胰腺泡主要由锥体形的腺泡细胞组成，与闰管相连，外有基膜，为典型的蛋白质分泌细胞。胰腺泡可分泌多种消化酶，如原
、胰原、胰、胰脂肪酶、DNA 酶和RNA 酶等，分别消化食物中的营养成分 ；胰腺泡也分泌抑制因子
，防止两种蛋白酶原被激活，腺泡腔内有泡心细胞，扁平或立方形，色浅
，是闰管起始部的上皮细胞
，为胰腺腺泡的特点。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠胰腺腺泡采用胶原酶消化法制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的小鼠胰腺腺泡经亚甲基蓝染色检测，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等
。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 悬浮

细胞形态 圆形

传代特性 不增殖；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%
；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s

，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃
，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次
，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)检测试剂盒 ，英文名： AHSG ELISA Kit

Mouse monocyte chemotactic protein 4 (MCP-4/CCL13) ELISA Kit 小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)检测试剂盒

ELISA 小鼠趋化因子(mouse RAES)  进口分装

CLIAKitforIGFBP-3(Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3)ELISAKit人胰岛素样生长因子结合蛋白3

通用型牛呼吸综合症(BRSV)试剂盒20次

ELISAKitPAP大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物

TNFSF8重组食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签) Protein

MEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1 0.5mgMEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MEK1/MAPKK1抗体(N-端)

ANP32A重组人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

EBAG9 Protein Human 重组人 RCAS1 / EBAG9 蛋白

PRLR Protein Mouse 重组小鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白

MEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1 0.5mgMEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MEK1/MAPKK1抗体(N-端)

EBAG9 Protein Human 重组人 RCAS1 / EBAG9 蛋白

TNFSF8重组食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签) Protein

PRLR Protein Mouse 重组小鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白

ANP32A重组人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

小鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 人热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)检测试剂盒

Humanmicroalbunminuria,MAU/ALBELISAKit 人尿微量白蛋白(ALB)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanAngiotensinaseA,ATA检测试剂盒人血管紧张肽酶A(ATA)检测试剂盒规格

：96T/48T

植物高质化线粒体分离试剂盒10次

Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit人β-促脂素(β-LPH)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠胰腺腺泡细胞小鼠钩端IgG(Lebtospira)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠睾(T)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠高迁移率族蛋白1(HMG-1)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠高敏状腺原酸(u-T3)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用


。

8. 备注

：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代

。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。