老哥俱乐部

细胞简介：

小鼠嗅上皮分离自嗅上皮组织
；嗅上皮细胞是鼻腔的嗅区黏膜的一种特殊的感觉性上皮细胞
，嗅上皮细胞为棱形双极细胞

，每个细胞表面为细长的嗅毛，突出于嗅区黏膜上皮细胞表面，而细胞的另一端为中央突，常汇成多数细微的嗅丝，组成嗅神经通向颅内
。这些细胞的特殊结构，是嗅觉功能的重要组成部分。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠嗅上皮采用胶原酶-联合消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的小鼠嗅上皮经β-Tubulin免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%
；CO2，5%

实验报告
：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置

；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s
，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

大鼠细胞外基质0酸糖蛋白(MEPE)检测试剂盒 
，英文名
： MEPE ELISA Kit

Mouse nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 小鼠神经生长因子(NGF)检测试剂盒

MouseN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHSVIAb(HumanHerpessimplexvirusIaibody)ELISAKit人单疱疹病毒Ⅰ型抗体

细胞JAK3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-2R大鼠白介素2受体

LMAN2L重组人 LMAN2L 蛋白 (Fc 标签) Protein

SYK (Spleen tyrosine kinase 0.5mgSYK (Spleen tyrosine kinase) 非受体型酪激酶(抗原)

IL1RAP重组人 IL-1RAcP / IL-1R3 蛋白 Protein

DPP4 Protein Human 重组人 DPP4 / CD26 蛋白

TNF Protein Human 重组人 TNF-alpha / TNFA 蛋白

SYK (Spleen tyrosine kinase 0.5mgSYK (Spleen tyrosine kinase) 非受体型酪激酶(抗原)

DPP4 Protein Human 重组人 DPP4 / CD26 蛋白

LMAN2L重组人 LMAN2L 蛋白 (Fc 标签) Protein

TNF Protein Human 重组人 TNF-alpha / TNFA 蛋白

IL1RAP重组人 IL-1RAcP / IL-1R3 蛋白 Protein

小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)检测试剂盒

HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit 人葡萄球菌蛋白A(SPA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠ检测试剂盒人血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)检测试剂盒规格：96T/48T

植物钙镁ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次

Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit人γ谷氨酰半胱合成酶(γ-ECS)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠嗅上皮细胞小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(mouse BMP-R2)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠脑肽(mouse BNP)   作用
：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠N端前脑素(mouse -proBNP)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP)   作用
：   ELISA   规格：      进口分装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基

、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态

。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，

，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决

。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞

，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。