老哥俱乐部

细胞简介
：

小鼠嗅球神经元分离自嗅球组织；嗅球是脊椎动物前脑结构中参与嗅觉的部分，用于感知气味。嗅球分为二个不同的结构：主嗅球及辅助嗅球。在大脑额叶来自许多嗅细胞的神经纤维缠集在一起，形成线球状的部分。在这里，纤维与多个次级神经元——僧帽细胞的树突相连接，进而由这里伸出神经纤维形成嗅囊，终止于额叶下方。一般认为它在嗅味的辨别中具有重要的功能。对于大部份的脊椎动物而言，嗅球位在大脑的前面，不过人的嗅球位于大脑的内部
。嗅球由筛骨的筛板固定且保护嗅球
，哺乳动物的筛板会分隔嗅球和嗅上皮，而嗅神经会穿过筛板中的筛孔而连接到嗅球
。嗅球分为二个不同的结构：主嗅球及辅助嗅球。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠嗅球神经元采用消化法
、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠嗅球神经元经β-Tubulin免疫荧光鉴定

，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含B-27 Supplement
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 神经元细胞样

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2
，5%

实验报告
：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养

；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定

：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基

，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5
、PBS冲洗细胞3次
，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠细胞色素P450家族成员2E1(CYP2E1)检测试剂盒 ，英文名： CYP2E1 ELISA Kit

Mouse nerve nuition factor 3 (-3) ELISA Kit 小鼠神经营养因子3(-3)检测试剂盒

Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHSP-90ELISAKit大鼠热休克蛋白90

细胞JNK3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-27大鼠白介素27

F9重组小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 蛋白 Protein

N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)重组蛋白 Recombinant N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase)

PTH重组人 PTH / PTH1 / Parathyroid Hormone 蛋白 (Fc 标签) Protein

DPP10 Protein Human 重组人 DPP10 / DPRP3 蛋白

TNFRSF21 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 TNFRSF21 / DR6 蛋白

白介素12受体β2(IL2Rβ2)重组蛋白 Recombinant Interleukin 12 Receptor Beta 2 (IL12Rb2)

DPP10 Protein Human 重组人 DPP10 / DPRP3 蛋白

SERPINB6B重组小鼠 Serpinb6b 蛋白 Protein

TNFSF4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 标签)

SAE1重组人 SAE1 蛋白 Protein

小鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human parathyroid hormone (i-PTH) ELISA Kit 人全段甲状旁腺素(i-PTH)检测试剂盒

Humancarboxyhemoglobin,HbCOELISAKit 人血红蛋白(HbCO)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humananapasticlymphomakinase,ALK检测试剂盒人间变性淋巴瘤激酶(ALK)检测试剂盒规格：96T/48T

植物多酚氧化酶(polyphenoloxidase;PPO)活性比色法定量检测试剂盒20次

MonkeyBvirusInfectionsELISAKit猴B病毒(BV)检测试剂盒规格
：96T/48T

小鼠嗅球神经元细胞小鼠骨胶原交联(Cr)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠骨碱性0酸酶（BALP）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠骨钙素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态
、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担

。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞

，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞

，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞

。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。