老哥俱乐部

细胞简介：

小鼠前列腺干分离自前列腺组织
；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成对的实质性器宫
，由腺组织和肌组织构成
。前列腺如栗子，底朝上，与膀胱相贴
，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面贴耻骨联合，后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过，扼守着尿道上口，所以，前列腺有问题时，排尿先受影响。前列腺是机体非常少有的，具有内、外双重分泌功能的性分泌腺
。作为外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液

，是构成精液主要成分
；作为内分泌腺
，前列腺分泌的激素称为“前列腺素"。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠前列腺干采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过前列腺干细胞专用培养基培养筛选制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠前列腺干经Sca-1免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV

、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 长梭形

传代特性 可传2-3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养
：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置

；

3

、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2

、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品
：

大鼠纤调蛋白(FMOD)检测试剂盒 ，英文名： FMOD ELISA Kit

Mouse chorionic gonadoopin beta (-CG beta) ELISA Kit 小鼠绒毛膜β(β-CG)检测试剂盒

Mouseiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 小鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHTLV-I(Huma-lymphoopicvirusI)ELISAKit人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒

细胞HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性检测试剂盒20次

ELISAKitBTA大鼠膀胱肿瘤抗原

TNFRSF14重组小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶IG抗原

CYB5R1重组人 CYB5R1 蛋白 Protein

GALK1 Protein Human 重组人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 标签)

SIRPA Protein Rat 重组大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白

Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶IG抗原

GALK1 Protein Human 重组人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 标签)

TNFRSF14重组小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

SIRPA Protein Rat 重组大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白

CYB5R1重组人 CYB5R1 蛋白 Protein

小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human homocysteic acid (Hcy) ELISA Kit 人同型半胱(Hcy)检测试剂盒

Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISAKit 人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanBullousPemphigoid,BP检测试剂盒人大疱性类天疱疮抗体(BP)检测试剂盒规格：96T/48T

植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒10/20次

HumansolubleTumorNecrosisFactorαreceptor

，sTNFαRELISAKit人可溶性坏死因子α受体(sTNFαR)检测试剂盒规格
：96T/48T

小鼠前列腺干细胞兔子髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子前列腺素E2(PGE2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子前列腺素E1(PGE1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子皮质/上腺(CO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基
、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min

，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，

，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1


：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。