① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：小鼠臍靜脈內皮細胞

英文名稱 ：Mouse Umbilical Vein Endothelial Cells

組織來源 ：臍帶組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠臍靜脈內皮分離自臍帶組織 ；它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一 ，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用 。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構 ，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈 ，卵黃囊的血管即臍腸係膜動脈及臍腸係膜靜脈 。在子宮中 ，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管 ，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近 ，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤 ，臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒 。

公司實驗室分離的小鼠臍靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法 、並通過內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠臍靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

包被條件 PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長。

蔗糖測定試劑盒（紫外比色法）

γ-穀酰半胱酸合成酶（γ-GCS）測定試劑盒（速率法）

超微量ATP酶測試盒（Na+K+ 、Ca2+Mg2+ 、T－ATP酶）

總巰基（-SH）測定試劑盒

植物鈣調素(CAM)ELISA 試劑盒

Human ai nuclear factor aibody (ANF) ELISA Kit 人抗核因子抗體(ANF)試劑盒

Porcineadiponectin,ADPELISAKit 豬脂聯素(ADP)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforADV-IgM(HumanAdenovirusIgM)ELISAKit人腺病毒IgM

血液氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發光法定量試劑盒50次

MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit小鼠幹細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒

ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

chloramphenicol/OVA 氯偶聯雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯雞卵白蛋白蛋白

GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標簽) Protein

ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標簽)

LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 標簽)

chloramphenicol/OVA 氯偶聯雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯雞卵白蛋白蛋白

ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標簽)

ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 標簽)

GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠臍靜脈內皮細胞大鼠鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)試劑盒  ，英文名 ： CAMK2α ELISA Kit

Rat beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 大鼠β澱粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒

RatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforDSIP(Humandeltasleep-inducingpeptide)ELISAKit人促睡眠肽

細胞培養液抗壞血酸比色法定量試劑盒20次

RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)試劑盒

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用