老哥俱乐部

细胞简介：

小鼠卵泡颗粒细胞（卵巢颗粒细胞）分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色
，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。卵巢颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞，其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾体激素分泌等卵巢功能活动。卵巢颗粒细胞是卵泡内的大细胞群，也是主要的功能细胞，卵泡发育的显著标志之一就是颗粒细胞迅速生长及增殖，而成年动物的卵泡闭锁主要是由颗粒细胞凋亡引起，尤其在卵泡发育后期，此外
，颗粒细胞还与卵泡膜细胞共同完成卵巢激素的合成
，维持着有利于卵母细胞生长和成熟的微环境
。细胞形状呈圆形或椭圆形。

方法简介
：

实验室分离的小鼠卵泡颗粒采用先机械分离，而后胶原酶消化，后差速贴壁法制备而来

，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的小鼠卵泡颗粒经FSHR免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养信息
：

包被条件
：PLL（0.1mg/ml）

培养基：基础培养基
，含FBS、EGF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性

：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2

，5%

小鼠卵泡颗粒体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态
。

实验报告：

一
、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s
，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化

；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min

；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次

，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)检测试剂盒 ，英文名： ANGPTL2 ELISA Kit

Mouse prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit 小鼠前列腺素E2(PGE2)检测试剂盒

Mouseangiopoietieceptoie1,ANG-R-Tie1ELISAkit 小鼠血管生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanCA724ELISAKit人肿瘤标志物

细胞C-TAK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitM-AChR大鼠受体

NRP2重组人 Neuropilin-2 / NRP2 蛋白 Protein

微管关联蛋白1A(MAP1A)重组蛋白 Recombinant Microtubule Associated Protein 1A (MAP1A)

CDNF重组人 CDNF / ARMETL1 蛋白 (Fc 标签) Protein

CTLA4 Protein Human 重组人 CTLA4 / CD152 蛋白

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

微管关联蛋白1A(MAP1A)重组蛋白 Recombinant Microtubule Associated Protein 1A (MAP1A)

CTLA4 Protein Human 重组人 CTLA4 / CD152 蛋白

NRP2重组人 Neuropilin-2 / NRP2 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

CDNF重组人 CDNF / ARMETL1 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠脑啡肽(ENK)检测试剂盒 96T 试剂盒 组装/原装

Rat thyroxine aibody (TAb) ELISA Kit 大鼠甲状腺素抗体(TAb)检测试剂盒

HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 人未0酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Human5-lipoxygenase,5-LO/LOX检测试剂盒人5脂加氧酶(5-LO/LOX)检测试剂盒规格：96T/48T

真菌格莫瑞(Gomori'sMethenamineSilver;GMS)银染试剂盒50次

Mouseai-redcellaibodyELISAKit小鼠抗红细胞抗体(RBC)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠卵泡颗粒细胞小鼠抗内膜抗体(EMAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基
、血清比例


、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞

。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

。