細胞簡介 ：

小鼠口腔上皮分離自口腔黏膜組織 ；口腔上皮細胞是一種上皮細胞 ，呈扁平 、多邊形 ，形狀不規則 。口腔各壁都有黏膜覆蓋 ，口腔上皮細胞主要分布在口腔兩側頰部 。上皮的垂直切麵上 ，細胞形狀不一 。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀 ，為具有增殖分化能力的幹細胞 ，部分子細胞向淺層移動 。基底層以上是數層多邊形細胞，再上為幾層梭形或扁平細胞。僅靠近表麵幾層細胞為扁平狀 ，基底層細胞能不斷分裂增生 ，以補充表層衰老或損傷脫落的細胞 。複層扁平上皮深層的結締組織內有豐富的毛細血管 ，有利於複層扁平上皮的營養 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的小鼠口腔上皮先消化 、後-膠原酶混合消化法製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠口腔上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS 、生長添加劑、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)檢測試劑盒  ，英文名 ： MCP-1/CCL2 ELISA Kit

Mouse ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 小鼠睫狀神經營養因子(CF)檢測試劑盒

MousephosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽

同位素標記放射活性離心柱檢測試劑盒20次

ELISAKitpERK大鼠0酸化細胞外信號調節激酶

IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細胞核因子或稱k基因結合核因子(多肽抗原)

TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細胞核因子或稱k基因結合核因子(多肽抗原)

GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

小鼠半胱酸蛋白酶抑製劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)檢測試劑盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細胞外信號調節激酶(ERK)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG檢測試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠口腔上皮細胞兔子髓0脂堿性蛋白檢測試劑盒   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒   規格型號 ：96T/48T   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒 、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

兔子結合蛋白4檢測試劑盒   兔子結合蛋白4試劑盒   規格型號 ：96T/48T   兔子結合蛋白4試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名：兔子結合蛋白4試劑盒 、兔子結合蛋白4eisa試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

兔子透明質酸檢測試劑盒   兔子透明質酸試劑盒   規格型號 ：96T/48T   兔子透明質酸試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：兔子透明質酸試劑盒 、兔子透明質酸eisa試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

人血管緊張素原檢測試劑盒   人血管緊張素原試劑盒   規格型號 ：96T/48T   人血管緊張素原試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：人血管緊張素原試劑盒 、人血管緊張素原eisa試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。