老哥俱乐部

细胞简介：

小鼠口腔上皮分离自口腔黏膜组织；口腔上皮细胞是一种上皮细胞，呈扁平
、多边形，形状不规则

。口腔各壁都有黏膜覆盖，口腔上皮细胞主要分布在口腔两侧颊部
。上皮的垂直切面上
，细胞形状不一
。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状，为具有增殖分化能力的干细胞，部分子细胞向浅层移动。基底层以上是数层多边形细胞，再上为几层梭形或扁平细胞。仅靠近表面几层细胞为扁平状
，基底层细胞能不断分裂增生，以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织内有丰富的毛细血管

，有利于复层扁平上皮的营养。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠口腔上皮先消化、后-胶原酶混合消化法制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的小鼠口腔上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息
：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1代

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%
；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗

，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

大鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)检测试剂盒 
，英文名
： MCP-1/CCL2 ELISA Kit

Mouse ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 小鼠睫状神经营养因子(CF)检测试剂盒

MousephosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽

同位素标记放射活性离心柱检测试剂盒20次

ELISAKitpERK大鼠0酸化细胞外信号调节激酶

IL10重组猫 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 细胞核因子或称k基因结合核因子(多肽抗原)

TWF1重组人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

GALE Protein Human 重组人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

S100A8 Protein Mouse 重组小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 细胞核因子或称k基因结合核因子(多肽抗原)

GALE Protein Human 重组人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

IL10重组猫 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

S100A8 Protein Mouse 重组小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

TWF1重组人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

小鼠半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)检测试剂盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人细胞外信号调节激酶(ERK)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG检测试剂盒人菌抗体IgG(BrucellaAbIgG)检测试剂盒规格：96T/48T

植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠口腔上皮细胞兔子髓0脂碱性蛋白检测试剂盒   兔子髓0脂碱性蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子髓0脂碱性蛋白试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名：兔子髓0脂碱性蛋白试剂盒、兔子髓0脂碱性蛋白eisa试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期
：6个月。

兔子结合蛋白4检测试剂盒   兔子结合蛋白4试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子结合蛋白4试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：兔子结合蛋白4试剂盒
、兔子结合蛋白4eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月
。

兔子透明质酸检测试剂盒   兔子透明质酸试剂盒   规格型号
：96T/48T   兔子透明质酸试剂盒
，规格型号
：96T/48T
，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名

：兔子透明质酸试剂盒、兔子透明质酸eisa试剂盒   保存条件

：2-8℃   保质期
：6个月

。

人血管紧张素原检测试剂盒   人血管紧张素原试剂盒   规格型号：96T/48T   人血管紧张素原试剂盒

，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：人血管紧张素原试剂盒
、人血管紧张素原eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月。

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例

、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片

，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞

，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞

。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。