細胞簡介 ：

小鼠晶狀體上皮分離自晶狀體組織 ；晶狀體源自胚胎發育外胚層 ，僅含有上皮細胞及其產物 ，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞分開 ；因而 ，晶狀體上皮細胞培養既無神經和血管組織的幹擾 ，又不受其它類型細胞如成纖維細胞的汙染 ，保證了培養中細胞成分的單一性。晶狀體上皮細胞主要負責調節晶狀體的生理平衡 ，包括電解質和液體的輸送 。在正常的發育過程中 ，晶狀體上皮細胞分化和成熟 ，然後遷移到晶狀體內部 ，產生晶體蛋白 ，自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞 ，並終失去細胞核和其它的細胞器 。研究表明，晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調控 ，包括表皮生長因子和胰島素等 。細胞貼壁後為扁平不規則多角形 ，呈單層生長 、連成膜狀 。晶狀體上皮細胞是緊密貼附於晶狀體前囊內表麵的單層上皮細胞 ，其異常增殖和分化與白內障和後囊混濁的發生密切相關 ，體外培養是研究其生長規律的主要手段 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的小鼠晶狀體上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法 ，並通過上皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠晶狀體上皮經BFSP2（晶狀體蛋白）免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

心血管活性多肽   英文名稱 ：   Apelin   規格：      英文縮寫 ：   AP

轉錄因子AP-1   英文名稱 ：   anscription Factors AP-1   規格 ：      英文縮寫 ：   AP-1

0酸化AKT蛋白   英文名稱 ：   phosphorylation AKT   規格 ：      英文縮寫 ：   p-AKT

晚期糖基化終末產物   英文名稱 ：   advanced glycosylation end products   規格 ：      英文縮寫 ：   AGEs

小鼠胰島素原(PI)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 人可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒

HumanprocollagenCpeptidase,PCPELISAKit 人前膠原C端肽酶(PCP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor26SPSM(Human26Sproteasome)ELISAKit人26S蛋白酶體

飲料甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性試劑盒20次

MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒規格 ：96T/48T

OSM重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 Protein

白介素3(IL3)重組蛋白 Recombinant Interleukin 3 (IL3)

SRI重組人 SRI / Sorcin 蛋白 Protein

CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白

CLEC5A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白

Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1 0.5mgApaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)

CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白

FGFR1重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 Protein

CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白 (Fc 標簽)

ADM重組人 ADM / Adrenomedullin 蛋白 (Fc 標簽) Protein

小鼠晶狀體上皮細胞大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)試劑盒  ，英文名 ： HDL2 ELISA Kit

Porcine ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 豬白介素1β (IL-1β)試劑盒

埃博拉病毒(EBOV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMHB(RatMethemoglobin,MHB)ELISAKit大鼠高鐵血紅蛋白

體液尿酸含量直接(TPTZ)比色法定量試劑盒50次

ELISAKitPCK牛0酸烯醇式同酸羧激酶

注意事項：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。