① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：小鼠肝內膽管上皮細胞

英文名稱 ：Mouse Intrahepatic Bile Duct Epithelial Cells

組織來源 ：肝髒組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠肝內膽管上皮分離自肝髒組織 ；肝髒是身體內以代謝功能為主的一個器官 ，並在身體裏麵起著去氧化 、儲存肝糖 、分泌性蛋白質的合成等作用 ；肝髒也製造消化係統中之膽汁 。肝髒是機體內髒裏大的器官 ，位於機體中的腹部位置 ，在右側橫隔膜之下 ，位於膽囊之前端且於右邊腎髒的前方 ，胃的上方 。肝髒是機體消化係統中大的消化腺 ，為一紅棕色的V字形器官 。肝髒是尿素合成的主要器官 ，又是新陳代謝的重要器官 。肝髒在機體位置和形態結構 ：肝髒位於右上腹 ，隱藏在右側膈下和肋骨深麵 ，大部分肝為肋弓所複蓋 ，僅在腹上區 、右肋弓間露出並直接接觸腹前壁 ，肝上麵則與膈及腹前壁相接 。通過控製激素調控的分泌和吸收 ，在保持 、調整和擴大膽小管的結構中發揮重要作用 ，肝內膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方麵起著積極作用 。肝內膽管上皮細胞約占肝細胞總數的5% ，其在肝內膽道係統內形成複雜的網狀管形結構 。肝內膽管上皮細胞具有複雜的生理代謝功能 ，參與肝髒的代謝 、排泌 、免疫等生理過程 ，在肝髒疾病的發生發展過程中起一定的作用 。研究表明 ，常見的肝內膽管病變例如原發性硬化性膽管炎 、膽管癌等疾病 ，都是以肝內膽管上皮細胞為病變靶位 ，進而引起肝內膽管上皮損傷 。因此 ，了解正常肝內膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內膽管病變的發病機製 、診斷和治療具有重要意義 。

公司實驗室分離的小鼠肝內膽管上皮采用膠原酶灌注消化法後 ，再用膠原酶-DNA酶聯合消化 ，接種至預先包被鼠尾膠原的培養瓶中 ，通過上皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠肝內膽管上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體、細菌 、酵母和真菌等 。

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

氧化酶（XOD）測試盒（比色法）

植物二(MDA)測定試劑盒(比色法)

（VitaminE）測定試劑盒（比色法）

超微量Na+K+–ATP酶測定試劑盒

鴨白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai bactericidal permeability increasing protein aibody (BPI-Ab) ELISA Kit 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)試劑盒

HumanVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISAKit 人血管活性腸肽(VIP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforACO-2(Humanaconitase2)ELISAKit人烏頭酸酶2

煙草葉片原生質細胞分離試劑盒5次

Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit小鼠纖溶酶抗纖溶酶複合物(PAP)試劑盒規格 ：96T/48T

CNTN5重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein

含RNA結合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白 Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)

PROS1重組人 PROS1 / Protein S 蛋白 Protein

CAMK4 Protein Human 重組人 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (GST 標簽)

CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

含RNA結合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白 Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)

CAMK4 Protein Human 重組人 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (GST 標簽)

CNTN5重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein

CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

PROS1重組人 PROS1 / Protein S 蛋白 Protein

小鼠肝內膽管上皮細胞大鼠胱抑素S(CST4)試劑盒  ，英文名 ： CST4 ELISA Kit

Rabbit apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 兔載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒

乙型流感病毒(IBV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-5(Humanmaixmetalloproteinase5)ELISAKit人基質金屬蛋白酶5

體液基質金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitVK1犬K1

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用