老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养

。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称

：小鼠腹膜间皮细胞

英文名称：Mouse Peritoneal Mesothelial Cells

组织来源：腹膜组织

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠腹膜间皮分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞构成
，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果
。腹膜（peritoneum）为全身面积大
、配布复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成
，薄而光滑，呈半透明状
。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄层
；覆盖腹

、盆腔器表面的部分称为脏腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行
，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜间皮细胞属于上皮组织中的单层扁平上皮
，是覆盖于腹膜表面的一层细胞。间皮细胞是构成间皮的细胞
，正常大小约为15-25微米

，细胞常呈圆形或者卵圆形。其功用是提供润滑，使器官与器官、器官与胸膜与腹膜间都能得到良好的保护
，不会互相磨损受伤。而间皮所生产的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的物质来达成，分泌物多半为细胞外基质、玻尿酸类物质
。

公司实验室分离的小鼠腹膜间皮采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠腹膜间皮经PCK、Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等
。

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%
；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2


、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟

。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液

，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液

，接种培养后
，细胞容易贴壁生长。

大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)检测试剂盒 ，英文名： ELA2 ELISA Kit

Mouse soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)检测试剂盒

MouseFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 小鼠FMS样酪激酶3配体(Flt3L)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanhumanlysosomal-associatedmembraneprotein2,HLAMP-2ELISAKit人溶酶体相关膜蛋白2

B1比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitDes大鼠结蛋白

BMPR1B重组人 BMPR1B / ALK-6 蛋白 (Fc 标签) Protein

Tachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor 0.5mgTachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor ) 抗菌肽

THPO重组人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 Protein

CSF1 Protein Human 重组人 M-CSF / CSF-1 蛋白

TNFRSF10A Protein Human 重组人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 (His & Fc 标签)

Tachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor 0.5mgTachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor ) 抗菌肽

CSF1 Protein Human 重组人 M-CSF / CSF-1 蛋白

BMPR1B重组人 BMPR1B / ALK-6 蛋白 (Fc 标签) Protein

TNFRSF10A Protein Human 重组人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 (His & Fc 标签)

THPO重组人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 Protein

小鼠迁移率族蛋白B1(HMGB-1)检测试剂盒 96T/48T

Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)检测试剂盒

HumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit 人着丝粒蛋白B(CENP-B)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKL检测试剂盒仓鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)检测试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒(包括抗体)20次

MouseBigEndothelin,BigETELISAKit小鼠大内皮素(BigET)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠腹膜间皮细胞小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠钙通道阻滞剂(CCB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠转酶/谷转酶(ALT/GPT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用，非食用