① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：小鼠肺小動脈內皮細胞

英文名稱 ：Mouse Pulmonary Arteriolar Endothelial Cells

組織來源 ：肺小動脈

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠肺小動脈內皮分離自肺小動脈組織 ；肺動脈幹是短而粗的動脈 ，自右心室的動脈圓錐起始 ，向左後上方斜升 ，先在升主動脈根部的前麵 ，繼而至其左側 ，至主動脈弓的下方 ，約在第5胸椎高度 ，分為左 、右肺動脈 。左肺動脈較短 ，橫行向左 ，經左主支氣管前方至左肺門 ，分兩支進入左肺的上 、下葉 。右肺動脈較長 ，橫行向右 ，經主動脈升部和上腔靜脈的後方達右肺門 ，分3支進入右肺上 、中 、下葉 。左 、右肺動脈的各分支在肺實質內又反複分支 ，與支氣管的分支伴行 ，後達肺泡壁 ，形成稠密的毛細血管網 。肺動脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血 。在肺動脈幹分叉處稍左側與主動脈弓下緣之間有一結締組織索 ，稱動脈韌帶 。管徑在0.3～1mm之間 ，為小動脈（small-artery） ，小動脈包括粗細不等的幾級分支 ，也屬肌性動脈 。較大的小動脈 ，內膜有明顯的內彈性膜 ，中膜有幾層平滑肌 ，外膜厚度與中膜相近 ，一般沒有外彈性膜 。口徑在1mm以下的動脈 ，管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質纖維 。小動脈是決定周圍循環阻力大小的主要因素 ，也是調節微循環灌注量的“總開關" 。典型的小動脈 ，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2 。中膜的肌層相對比其他動脈為厚 ，當平滑肌在神經支配下強力收縮時 ，其管腔可以閉塞 ，而使血液不能流入它所分布的毛細血管內 ，從而增加了周圍血液循環的阻力 。如果有許多小動脈同時收縮 ，可使血壓顯著上升。反之 ，當小動脈的平滑肌舒張時 ，則可使大量的血液流入毛細血管 ，外周阻力明顯下降 ，血壓降低 。終末小動脈(terminal arteri-ole)的口徑為20～30μm ；後小動脈(metar-teriole) ，又稱毛細血管前小動脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12～15μm 。管壁內均有較稀疏的平滑肌 ，在毛細血管前小動脈分支的起始部分 ，管壁平滑肌成分增厚 ，叫做毛細血管前括約肌(precapillary sphinc-ter)，其收縮或舒張 ，可調節真毛細血管的血流量 ，是調節微循環灌注量的“分開關" 。支配小動脈平滑肌的交感神經纖維 ，可延伸到終末小動脈和後小動脈的平滑肌細胞。在毛細血管前括約肌上交感神經纖維特別豐富 。肺小動脈內皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布 ，該細胞在維持血管內外的動態平衡 、合成和分泌細胞因子和介質 、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用 。

實驗室分離的小鼠肺小動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法 、並通過內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的小鼠肺小動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

包被條件 ：PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 ：基礎培養基 ，含FBS 、EGF、bFGF 、IGF 、VEGF 、Heparin 、Hydrocortisone 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：內皮細胞樣

傳代特性 ：可傳1-3代

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

小鼠肺小動脈內皮體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠DNA甲基轉移酶1(DNMT1)檢測試劑盒  ，英文名 ： DNMT1 ELISA Kit

Mouse stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 小鼠幹細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)檢測試劑盒

ELISA 小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(mouse VEGF-R1)  進口分裝

CLIAKitforICTPELISAKit小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽

通用型A含量比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitDHT大鼠雙氫睾同

HA重組甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PMP-22(Peripheral Myelin Protein 0.5mgPMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽

TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CS Protein Human 重組人 Citrate synthase / CS 蛋白

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白

PMP-22(Peripheral Myelin Protein 0.5mgPMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽

CS Protein Human 重組人 Citrate synthase / CS 蛋白

HA重組甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白

TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽) Protein

小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 大鼠基質金屬蛋白酶4(MMP-4)檢測試劑盒

HumanMetallothionein,MTELISAKit 人金屬硫蛋白(MT)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1檢測試劑盒豚鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

真菌/酵母細胞內氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(過氧亞硝基陰離子)20次

MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)檢測試劑盒規格：96T/48T

小鼠肺小動脈內皮細胞小鼠0脂酶A2(PL-A2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠0酸葡萄糖變位酶(PGM)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)檢測試劑盒      試劑盒   組裝/原裝

小鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用