細胞簡介 ：

兔腎髒微血管內皮分離自腎髒 ；腎髒是兔的重要器官 ，它的基本功能是生成尿液 ，借以清除體內代謝產物及某些廢物 、毒物 ，同時經重吸收功能保留水分及其他有用物質 ，如葡萄糖 、蛋白質 、氨基酸 、鈉離子 、鉀離子 、等 ，以調節水 、電解質平衡及維護酸堿平衡 。腎髒同時還有內分泌功能 ，生成腎素、促紅細胞生成素 、活性3 、前列腺素 、激肽等 ，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官 。腎髒的這些功能 ，保證了機體內環境的穩定 ，使新陳代謝得以正常進行 。腎髒內部的結構 ，可分為腎實質和腎盂兩部分 。在腎縱切麵可以看到 ，腎實質分內外兩層：外層為皮質 ，內層為髓質 。腎皮質位於腎實質表層 ，富含血管 ，新鮮時呈紅褐色 ，由一百多萬個腎單位組成 。每個腎單位由腎小體和腎小管所構成 ，部分皮質伸展至髓質錐體間 ，成為腎柱 。腎髓質位於腎皮質的深麵 ，血管較少 ，色淡紅 ，為10-20個錐體所構成 。腎錐體在切麵上呈三角形 。錐體底部向腎凸麵 ，向腎門 ，錐體主要組織為集合管，錐體稱腎乳頭 ，每一個乳頭有10-20個乳頭管 ，向腎小盞漏鬥部開口 。在腎竇內有腎小盞 ，為漏鬥形的膜狀小管 ，圍繞腎乳頭 。腎錐體與腎小盞相連接 。每腎有7-8個腎小盞 ，相鄰2-3個腎小盞合成一個腎大盞 。每腎有2-3個腎大盞 ，腎大盞匯合成扁漏鬥狀的腎盂 。腎盂出腎門後逐漸縮窄變細 ，移行為輸尿管 。腎單位是腎髒結構和功能的基本單位 。腎小體包括腎小球和腎小囊 。腎小體內有一個毛細血管團 ，稱為腎小球 ，腎小球是個血管球 。它由腎動脈分支形成 。腎小球外有腎小囊包繞 。腎小囊分兩層 ，兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通 。腎小管匯成集合管 。若幹集合管匯合成乳頭管 ，尿液由此流入腎小盞 。微血管又稱毛細血管 。分布於各種組織和細胞間的微細的血管 。介於微動脈和微靜脈之間 。平均直徑7-9微米 ，數量極多 ，成網狀分布 。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成 ，厚約0.5微米 。基膜外麵有薄層結締組織 ，其中有纖維細胞 、巨噬細胞和周細胞等 。細的毛細血管由一個內皮細胞圍成管腔 ，較粗的毛細血管由2-3個內皮細胞圍成 。分布於肌肉組織 、神經組織和結締組織中的毛細血管 ，內皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃） ，稱連續毛細血管 ；分布於內分泌腺 、腎髒等處的毛細血管 ，除有縫隙連接外 ，細胞本身有許多小孔 ，（孔徑800-1000埃） ，稱有孔毛細血管 ；分布於肝 、脾 、骨髓及某些內分泌腺的毛細血管 ，管腔擴大 ，稱血竇 。毛細血管的管壁薄 、通透性大 、管徑細（8-10微米） 、數量多 、血流速度慢 ，這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所 ，又稱交換血管 。血竇（sinusoid）由毛細血管管腔擴大而成 ，竇壁的一般結構與毛細血管壁相同 ，由單層內皮細胞構成 ，內皮細胞膜上有窗孔 。不同器官的竇壁結構各有差別 。脾血竇的內皮細胞間有較寬裂隙 ；肝血竇內皮細胞是不連續的 ，有較寬的細胞隙（0.1-0.5微米） ；肝 、脾血竇的基膜不完整或無基膜 ，通透性比毛細血管大 ，較大的蛋白質和血細胞可以通過 。肝血竇壁內有枯否細胞 ，脾血竇內外有巨噬細胞 ，這兩種細胞都有吞噬能力，可吞噬清除血液中的異物 、細菌等有害物質 ，是機體單核巨噬細胞係統的重要組成分 。某些內分泌腺的血竇有連續的基膜 。

方法簡介 ：

實驗室分離的兔腎髒微血管內皮采用膠原酶消化 ，結合內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔腎髒微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 ：PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 ：含FBS 、EGF 、bFGF 、IGF 、VEGF 、Heparin 、Hydrocortisone 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：內皮細胞樣

傳代特性 ：可傳2-3代

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

兔腎髒微血管內皮體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)檢測試劑盒  ，英文名： IL1Ra ELISA Kit

Human ubiquitin activating enzyme (E1/UBAE) ELISA Kit 人泛素激活酶(E1/UBAE)檢測試劑盒

rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit 兔子白介素4(IL-4)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-CG(MouseChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit小鼠絨毛膜β

細菌乙醇比色法定量檢測試劑盒20次

Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

CXCL16重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標簽) Protein

NPY ( Neuropeptide Y 0.5mgNPY ( Neuropeptide Y)1-36 神經肽 Y(1-36多肽)

CNDP2重組人 CNDP2 / CPGL / PEPA 蛋白 Protein

IL6ST Protein Human 重組人 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白

TSPAN7 Protein Mouse 重組小鼠 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白

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豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human surface membrane immunoglobulin (SmIg) ELISA Kit 人細胞膜表麵免疫球蛋白(SmIg)檢測試劑盒

HumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclin-dependekinase2,CDK-2檢測試劑盒人周期素依賴性激酶2(CDK-2)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

組織GRK4激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Humanprealbumin ，PAELISAKit人前白蛋白(PA)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

兔腎髒微血管內皮細胞人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒檢測試劑盒   人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒   規格型號 ：96T/48T   人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒 、人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

人細胞外基質0酸糖蛋白檢測試劑盒   人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒   規格型號 ：96T/48T   人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒 、人細胞外基質0酸糖蛋白檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

人髓樣分化因子初次應答基因88檢測試劑盒   人髓樣分化因子初次應答基因88試劑盒   規格型號 ：96T/48T   人髓樣分化因子初次應答基因88試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：人髓樣分化因子初次應答基因88試劑盒 、人髓樣分化因子初次應答基因88 檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月。

人絲酸蛋白酶抑製因子肽酶抑製因子進化枝3G檢測試劑盒   人絲酸蛋白酶抑製因子肽酶抑製因子進化枝3G試劑盒   規格型號 ：96T/48T   人絲酸蛋白酶抑製因子肽酶抑製因子進化枝3G試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：人絲酸蛋白酶抑製因子肽酶抑製因子進化枝3G試劑盒 、人絲酸蛋白酶抑製因子肽酶抑製因子進化枝3G 檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。