細胞簡介：

兔三叉神經元分離自三叉神經組織 ；三叉神經為粗大的混合性腦神經 ，含一般軀體感覺和特殊內髒運動兩種纖維 。其特殊內髒運動纖維起於腦橋中段的三叉神經運動核 ，纖維組成三叉神經運動根 ，由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦 ，位於感覺根下內側 ，後進入三叉神經第3支下頜神經中 ，經卵圓孔出顱 ，隨下頜神經分支分布於咀嚼肌等。運動根內還含有三叉神經中腦核有關的纖維 ，主要傳導咀嚼肌的本體感覺 。三叉神經內以軀體感覺神經纖維為主 ，這些纖維的細胞體位於三叉神經節（半月節）內 ，該神經節位於顱中窩顴骨岩部的前麵三叉神經壓跡處 ，為硬腦膜形成的美克爾腔包裹 。三叉神經節由假單極神經元組成 ，其中樞突集中構成了粗大的三叉神經感覺根 ，由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦 ，止於三叉神經諸感覺核 ，其中傳導痛溫覺的纖維主要終止於三叉神經脊束核 ；傳導觸覺的纖維主要終止於三叉神經腦橋核 。三叉神經節細胞的周圍突組成三叉神經三大分支 ，即第1支眼神經 、第2支上頜神經、第3支為下頜神經 。從3大分支不斷分支分布於麵部皮膚 、眼及眶內 、口腔 、鼻腔 、鼻旁竇的粘膜 、牙 、腦膜等 ，傳導痛 、溫 、觸等多種感覺 。

方法簡介 ：

實驗室分離的兔三叉神經元采用消化法結合神經元專用培養基培養 、化學試劑抑製法篩選製備而來，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔三叉神經元經β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 ：PLL（0.1mg/ml）

培養基 ：含B-27 Supplement 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：神經元細胞樣

傳代特性 ：屬於終末分化細胞 ；屬於不增殖細胞群

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

兔三叉神經元體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠雌二醇受體(ER)檢測試劑盒  ，英文名 ： ER ELISA Kit

Mouse 5 nucleotidase (5-) ELISA Kit 小鼠5核苷酸酶(5-)檢測試劑盒

ELISA 小鼠CXCL1/KC(mouse KC)  進口分裝

CLIAKitforLF/LTF(MouseLactoferrin)ELISAKIT小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白

通用型HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定性檢測試劑盒20次

ELISAKitMIF巨噬細胞移動抑製因子

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標簽) Protein

rHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原 100ugrHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原

ULBP1重組人 ULBP1 / RAET1 / N2DL1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

IFNA8 Protein Human 重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

GZMB Protein Human 重組人 Granzyme B / GZMB 蛋白

rHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原 100ugrHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原

IFNA8 Protein Human 重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標簽) Protein

GZMB Protein Human 重組人 Granzyme B / GZMB 蛋白

ULBP1重組人 ULBP1 / RAET1 / N2DL1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human gasin releasing peptide (GRP) ELISA Kit 人胃泌素釋放多肽(GRP)檢測試劑盒

Humanadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit 人能a1A受體(ADRA1A)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMR檢測試劑盒人協同刺激分子受體(CMR)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

組織CLK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanProteinkinaseA,PKAELISAKit人蛋白激酶A(PKA)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

兔三叉神經元細胞同型半胱酸（Hcy）測定試劑盒（酶循環法）

β-（D3-H）測定試劑盒（酶比色法）

D-二聚體（D-Dimer）測定試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）

轉鐵蛋白（F）測定試劑盒（免疫比濁法）

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。