老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞

、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化

，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：兔胚肝间充质干细胞

英文名称：Rabbit Embryo Hepatic Mesenchymal Stem Cells

组织来源：胚胎肝

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔胚肝间充质干分离自胚胎肝组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用
；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下
，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方
。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官
。间充质干细胞（MSC）是一种具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞。在不同的诱导条件下，可分化为多种造血细胞以外的组织细胞，并具有造血支持
、免疫调节
、组织修复等作用。间充质干细胞（MSCs）是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞，存在于骨髓、脂肪组织、脐血及多种胎儿组织。它可分泌多种细胞因子及生长因子，促进造血干细胞（HSC）的增殖与分化
。MSCs还具有免疫调节、抗炎和组织修复作用，可减轻移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相关并发症。胚胎肝非实质细胞中含有MSC，且量较大，可成为种子细胞
。

实验室分离的兔胚肝间充质干采用-胶原酶联合消化法制备而来
，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔胚肝间充质干经CD44免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV
、支原体、细菌
、酵母和真菌等
。

培养基：含FBS
、EGF、bFGF
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔胚肝间充质干体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层

，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠γ-基受体亚基α1(GABRA1)检测试剂盒 

，英文名
： GABRA1 ELISA Kit

Mice, superoxide dismase (SOD) ELISA Kit 小鼠超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒

ELISA 小鼠基质金属蛋白酶-2(mouse MMP-2)  进口分装

CLIAKitforIL-17ELISAKIT大鼠白介素17

通用型亮(leucine)含量比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitADAMTS13/vWF-cp大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶

IFNA5重组小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (Fc 标签) Protein

角蛋白1(KRT1)重组蛋白 Recombinant Keratin 1 (KRT1)

BIN2重组人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 Protein

IL12RB1 Protein Human 重组人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 蛋白

HAVCR1 Protein Canine 重组狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白

角蛋白1(KRT1)重组蛋白 Recombinant Keratin 1 (KRT1)

IL12RB1 Protein Human 重组人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 蛋白

IFNA5重组小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (Fc 标签) Protein

HAVCR1 Protein Canine 重组狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白

BIN2重组人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 Protein

豚鼠特异性免疫球蛋白E(sIgE)检测试剂盒 96T/48T

Human systemic lupus erythematosus (SLE) ELISA Kit 人系统性红斑狼疮(SLE)检测试剂盒

Humanansthyretin,TELISAKit 人转甲状腺素蛋白(T)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanc-sis检测试剂盒人c-sis检测试剂盒规格：96T/48T

组织EGFR激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

Humanprostacycline,PGIELISAKit人前列环素(PGI)检测试剂盒规格：96T/48T

兔胚肝间充质干细胞神经营养素 4(-4)   作用

：   ELISA   规格：   96T  

骨桥蛋白 ( Osteopoin)   作用：   ELISA   规格
：   96T   德国 IBL

OX-40 ELISA Kit   作用：   ELISA   规格：   96T   奥地利 Bender

Human sP53 Kit   作用
：   ELISA   规格：   96T   法国 Diaclone

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用