① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：兔腦微血管內皮細胞

英文名稱 ：Rabbit Brain Microvascular Endothelial Cells

組織來源 ：腦

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

兔腦微血管內皮分離自腦組織 ；腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分 ，它是組成腦微血管腔麵單層扁平上皮樣細胞 ，能夠限製可溶性物質和細胞等從血液進入大腦 ，大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性 。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力 、調節血壓 、抗血栓形成等有重要作用 ，在腦血管疾病的發病機製中有重要病理生理學意義 。與外周內皮細胞相同 ，大腦微血管內皮細胞表麵表達細胞粘附分子 ，調控白細胞進入大腦 。由於微血管內皮細胞的器官特異性 ，內皮細胞通常取源於疾病研究的相關組織 。其主要特征如下 ：①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接 ，產生很高的跨內皮阻抗 ，延遲細胞旁的通量 ；②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構 ，其液相物質胞飲水平較低 ；③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運係統 ，從而產生“兩極分化"的表現型 。

實驗室分離的兔腦微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法 、後通過內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔腦微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

包被條件 ：PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 ：含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：內皮細胞樣

傳代特性 ：可傳2-3代

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

兔腦微血管內皮體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

山羊免疫球蛋白A   英文名稱 ：   Immunoglobulin A   規格 ：      英文縮寫 ：   IgA

山羊   英文名稱 ：   Coisol   規格 ：      英文縮寫 ：   CO

山羊β   英文名稱 ：   β-Hydroxybyrate   規格 ：      英文縮寫 ：   Β-OHB

山羊胰島素   英文名稱 ：   lnsulin   規格 ：      英文縮寫 ：   INS

豚鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒  ，英文名 ： PGE2 ELISA Kit

Human cytokeratin low molecular weight (CK-LMW) ELISA Kit 人低分子量細胞角蛋白(CK-LMW)試劑盒

Monkeybrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBKELISAKit大鼠血管舒緩激肽

細菌尿肉湯500毫升

Rabbitleoopichormone,LHELISAKit兔子促黃體激素(LH)試劑盒規格 ：96T/48T

HA重組甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2 0.5mgPMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周圍神經髓鞘蛋白2抗原

SERPINE1重組人 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 Protein

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標簽)

PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2 0.5mgPMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周圍神經髓鞘蛋白2抗原

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白

HA重組甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標簽)

SERPINE1重組人 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 Protein

兔腦微血管內皮細胞大鼠可溶性CD80(sCD80/B7-1)試劑盒  ，英文名 ： sCD80/B7-1 ELISA Kit

Mice colorectal cancer aigen (CCA) ELISA Kit 小鼠結腸癌抗原(CCA)試劑盒

MouseCathepsinK,cath-KELISAKit 小鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanparathyroidhormone-likeprotein,PLPELISAKit人甲狀旁腺激素樣蛋白

同位素RNA北方雜交試劑盒5次

ELISAKitPL-A2大鼠0脂酶A2

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用 ，非食用