細胞簡介 ：

兔淋巴結淋巴分離自淋巴結 ；淋巴結是哺乳類的周圍淋巴器官 ，由淋巴細胞集合而成。呈豆形 ，位於淋巴管行進途中 ，是產生免疫應答的重要器官之一 。淋巴結表麵包有被膜 ，被膜的結締組織伸入淋巴結內形成小梁 ，構成淋巴結的支架 。被膜下為皮質區 ，淋巴結的中心及門部為髓質區 。皮質區有淋巴小結 、彌散淋巴組織和皮質淋巴竇（簡稱皮竇） ，髓質包括由致密淋巴組織構成的髓索和髓質淋巴竇（簡稱髓竇） 。淋巴竇的竇腔內有許多淋巴細胞和巨噬細胞 ，從輸入淋巴管流來的淋巴液先進入皮竇再流向髓竇 ，後經輸出淋巴管離開淋巴結 。淋巴結的主要功能是濾過淋巴液 ，產生淋巴細胞和漿細胞 ，參與機體的免疫反應 。淋巴結腫大或疼痛常表示其屬區範圍內的器官有炎症或其他病變 。主要功能是濾過淋巴液，產生淋巴細胞和漿細胞 ，參與機體的免疫反應 ；當局部感染時 ，細菌 、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入 ，引起局部淋巴結腫大 。如該淋巴結不能阻止和消滅它們 ，則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移 。淋巴結淋巴細胞是白細胞的一種 ，由次級淋巴器官淋巴結產生 ，是機體免疫應答功能的重要細胞成分 ；細胞為圓形細胞核 ，細胞質少 。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖 ，繼而發揮其免疫功能 。

方法簡介 ：

實驗室分離的兔淋巴結淋巴采用分離淋巴結組織 、研磨獲取單細胞懸液後通過密度梯度離心法製備而來 ，細胞總量約為1×106cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔淋巴結淋巴經過檢測 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 ：含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：懸浮

細胞形態 ：圓形

傳代特性 ：不增殖 ；不傳代

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

兔淋巴結淋巴體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠L選擇素(SELL)檢測試劑盒  ，英文名 ： SELL ELISA Kit

Mouse ai IgE receptor aibody ELISA Kit 小鼠抗IgE受體抗體檢測試劑盒

Mouseα-GlucosidaseELISAKit 小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanmyelinbasicprotein,MBPELISAKit人髓0脂堿性蛋白

同戊二酸脫氫酶(αketoglaratedehydrogenase)20單位

ELISAKitsCD30L大鼠可溶性白細胞分化抗原30配體

ACVR2B重組食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 Protein

IL-16(Interleukin-16 0.5mgIL-16(Interleukin-16) 白介素16抗原

TFRC重組人 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 蛋白 Protein

HBP1 Protein Human 重組人 HBP1 蛋白 (GST 標簽)

ERBB2 Protein Mouse 重組小鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 標簽)

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小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA 試劑盒 96T/48T

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兔淋巴結淋巴細胞兔素(Renin)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔神經生長因子（NGF）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔色素上皮衍生因子(PEDF)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。