產品名稱:兔口腔黏膜成纖維細胞
產品特點 :兔口腔黏膜成纖維細胞公司正在出售的產品TNFRSF19 Others Mouse 小鼠 TNFRSF19 / OY 人細胞裂解液 mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 小鼠胰腺癌beta細胞 ,Beta-TC-6細胞 EB (NBL-4)(牛胚氣管細胞) TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B
產品型號 :
更新日期 :2024-12-13
訪問次數 :21
兔口腔黏膜成纖維細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
兔口腔黏膜成纖維分離自口腔黏膜組織 ;口腔(oral cavity)是消化道的起始部分 。前借口裂與外界相通 ,後經咽峽與咽相續 。口腔內有牙 、舌等器官 。口腔的前壁為唇 、側壁為頰 、頂為齶 、口腔底為黏膜和肌等結構 。口腔借上 、下牙弓分為前外側部的口腔前庭(oral vestibule)和後內側部的固有口腔(oral cavity proper) ;當上 、下頜牙咬合時 ,口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙後方的間隙相通 。成纖維細胞(Fibroblast)是疏鬆結締組織的主要細胞成分 ,由胚胎時期的間充質細胞分化而來 。成纖維細胞較大 ,輪廓清楚 ,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構 ,其細胞核呈規則的卵圓形 ,核仁大而明顯 。成纖維細胞功能活動旺盛 ,細胞質嗜弱堿性 ,具明顯的蛋白質合成和分泌活動 ,在一定條件下 ,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化 ;成纖維細胞對不同程度的細胞變性 、壞死和組織缺損的修複有著十分重要的作用 。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形 、折光性良好 ,懸浮於培養基中 。30min細胞貼壁 ,其中部分開始伸出偽足 ,表現為小的突起 ;6h後細胞基本貼壁 ,伸展成梭形 ,胞核清晰 ,分布較均勻 ,散在生長 ,不聚集成團 ;細胞生長迅速 ,5-7天即呈融合狀態 ,細胞排列緊密 ,有的交叉重疊生長 ,平坦、胞體較大 ,細胞質透明 ,細胞核較大 ,呈橢圓形 ,顏色淡 。細胞融合 ,並彼此連接成網狀 ;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布 。
產品名稱 | 兔口腔黏膜成纖維細胞 | 組織來源 | 口腔黏膜 |
英文名稱 | Rabbit Oral Mucosal Fibroblast Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
實驗室分離的兔口腔黏膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化後差速貼壁製備而來 ,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。
質量檢測
實驗室分離的兔口腔黏膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
培養基 :含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳3代左右
消化液 :0.25%
培養條件 :氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
兔口腔黏膜成纖維體外培養周期有限 ;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ,以此保證該細胞的佳培養狀態 。
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
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HOXA1 Protein Human 重組人 HOXA1 蛋白
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兔白細胞介素-35(IL-35)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔白細胞介素-35(IL-35)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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