產品名稱 :兔甲狀腺濾泡上皮細胞
產品特點 :兔甲狀腺濾泡上皮細胞公司正在出售的產品Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 人細胞裂解液 C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人細胞裂解液 MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人細胞裂解液
產品型號 :
更新日期 :2024-12-13
訪問次數 :28
兔甲狀腺濾泡上皮細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
兔甲狀腺濾泡上皮分離自甲狀腺組織 ;甲狀腺是脊椎動物非常重要的腺體 ,屬於內分泌器官 。在哺乳動物身體中 ,它位於頸部甲狀軟骨下方 ,氣管兩旁 。甲狀腺表麵有結締組織被膜 ,表麵結締組織深入到腺實質 ,將實質分為許多不明顯的小葉 ,小葉內有很多甲狀腺濾泡和濾泡旁細胞 。甲狀腺控製使用能量的速度 、製造蛋白質 、調節機體對其他賀爾蒙的敏感性 。甲狀腺依靠製造甲狀腺素來調整這些反應 ,有T3和T4 。這兩者調控代謝 、生長速率還有調解其他的身體係統 。T3和T4由碘和酪胺酸合成 。甲狀腺也生產降鈣素 ,調節體內鈣的平衡 。其中 ,甲狀腺濾泡上皮細胞(也稱為濾泡細胞或主要細胞)是在甲狀腺細胞是負責生產和分泌甲狀腺激素 ,甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原(T3) 。
產品名稱 | 兔甲狀腺濾泡上皮細胞 | 組織來源 | 甲狀腺 |
英文名稱 | Rabbit Thyroid Follicular Epithelial Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
實驗室分離的兔甲狀腺濾泡上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法 ,並通過上皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔甲狀腺濾泡上皮經TG(甲狀腺球蛋白)免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 :含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :上皮細胞樣
傳代特性 :可傳1-2代
消化液 :0.25%
培養條件 :氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
兔甲狀腺濾泡上皮體外培養周期有限 ;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ,以此保證該細胞的佳培養狀態 。
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
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Mouse beta hexosaminidase A (beta -hexosaminidase A) ELISA Kit 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)檢測試劑盒
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Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CAD檢測試劑盒人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)檢測試劑盒規格 :96T/48T
轉基因油菜(canola)GT73品係試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNA4931408D14geneELISAKit人類似RIKENcDNA4931408D14基因檢測試劑盒規格 :96T/48T
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兔子雌二醇(E2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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兔子表皮生長因子(EGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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