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人真皮成纖維細胞

產品名稱 :人真皮成纖維細胞

產品特點 :人真皮成纖維細胞公司正在出售的產品Promocell C-20111 Keratinocyte GrowthMedium 2 KIT, 角質細胞生長培養基2型套裝 500ml, IL18R1 Others Canine 狗 IL18R1 人細胞裂解液 CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7

產品型號 :

更新日期 :2024-12-12

訪問次數 :21

人真皮成纖維細胞的詳細資料 :

人真皮成纖維細胞

實驗報告 :

人真皮成纖維細胞
一 、分離與培養 :

1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;

3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃  ,5%CO2 培養箱中培養 ;

5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;

2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;

3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;

5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;

6 、用PBS衝洗3次 ,每次10min ,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

細胞簡介 :

人真皮成纖維細胞

人真皮成纖維分離自真皮組織;真皮 ,位於表皮深層 ,向下與皮下組織相連 ,真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起 ,埋於基質內 。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性 ,又有韌性 。其由兩層組成——乳頭層與網狀層 。真皮的結構組成是膠原蛋白 、彈性纖維以及基質 。成纖維細胞(Fibroblast)是疏鬆結締組織的主要細胞成分 ,由胚胎時期的間充質細胞分化而來 。成纖維細胞較大 ,輪廓清楚 ,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構 ,其細胞核呈規則的卵圓形 ,核仁大而明顯 。成纖維細胞功能活動旺盛 ,細胞質嗜弱堿性 ,具明顯的蛋白質合成和分泌活動 ,在一定條件下 ,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化 ;成纖維細胞對不同程度的細胞變性 、壞死和組織缺損的修複有著十分重要的作用 。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形 、折光性良好 ,懸浮於培養基中 。30min細胞貼壁 ,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起 ;6h後細胞基本貼壁 ,伸展成梭形 ,胞核清晰 ,分布較均勻 ,散在生長 ,不聚集成團 ;細胞生長迅速 ,5-7天即呈融合狀態 ,細胞排列緊密 ,有的交叉重疊生長 ,平坦 、胞體較大 ,細胞質透明 ,細胞核較大 ,呈橢圓形 ,顏色淡 。細胞融合 ,並彼此連接成網狀 ;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布 。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括 :構造和維持組織的正常形態 ,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷後及時大量聚集修複損傷組織 。

產品名稱

人真皮成纖維細胞

組織來源

皮膚組織

英文名稱

Human Dermal   Fibroblast Cells

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

 

方法簡介 :

人真皮成纖維細胞

公司實驗室分離的人真皮成纖維采用先消化 、後-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法製備而來 ,細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的人真皮成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 :

人真皮成纖維細胞

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右 ;3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%

人真皮成纖維細胞

注意事項 :

人真皮成纖維細胞
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ,培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代  。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。

公司正在出售的產品 :
人真皮成纖維細胞

人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒

Human tumor specific aigen (TSA) ELISA Kit 人腫瘤特異性抗原(TSA)檢測試劑盒

HumanADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humaninsulinaoaibodies,IAA檢測試劑盒人胰島素自身抗體(IAA)檢測試劑盒規格 :96T/48T

組織基質金屬蛋白酶(MMP-9)琥珀酰明膠法比色定量檢測試劑盒20

HumanLegionellaaibodyIgM ,LPAb-IgMELISAKit人軍團菌抗體IgM(LPAb-IgM)檢測試劑盒規格 :96T/48T

AKT3重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 標簽) Protein

甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白 Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)

CDH1重組人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白

FK506結合蛋白樣蛋白(FKBPL)重組蛋白 Recombinant FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL)

IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

TFPI2重組小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白 Protein

ERBB2 Protein Rat 重組大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白

FKBP7重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 Protein

豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-)檢測試劑盒

humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7檢測試劑盒人周期素依賴性激酶7(CDK-7)檢測試劑盒規格 :96T/48T

組織GSK3α激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMNElastase)檢測試劑盒規格 :96T/48T

人真皮成纖維細胞人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名稱   方法   規格

人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T


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