① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：人羊膜成纖維細胞

英文名稱 ：Human Amniotic Fibroblast Cells

組織來源 ：羊膜

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

人羊膜成纖維分離自胎盤組織 ；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官 ，由羊膜 、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成 。胎兒在子宮中發育 ，依靠胎盤從母體取得營養 ，而雙方保持相當的獨立性 。胎盤還產生多種維持妊娠的激素 ，是一個重要的內分泌器官 。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖後代 ，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊 、鰓絲等與母體組織緊密結合 ，以達到母子間物質的交換 ，這樣的結構稱假胎盤 。羊膜是胎盤的內層 ，與眼結膜組織結構相似 ，含有眼表上皮細胞，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質 ，其光滑 ，無血管 、神經及淋巴 ，具有一定的彈性 ；在電鏡下 ，其分為五層 ：上皮層 、基底膜 、致密層 、纖維母細胞層和海綿層 ，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元 ，主要為Ⅰ 、Ⅲ 、Ⅳ 、Ⅴ 、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白 、層粘連蛋白等成份 。羊膜成纖維細胞主要來自基底膜 、致密層 、纖維母細胞層 。

實驗室分離的人羊膜成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結合差速貼壁法製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的人羊膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養基 ：含FBS 、bFGF 、Insulin 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：成纖維細胞樣

傳代特性 ：可傳3-5代左右

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

人羊膜成纖維體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠乳酸脫氫酶B(LDHB)檢測試劑盒  ，英文名 ： LDHB ELISA Kit

Mouse vasoactive iestinal peptide (VIP) ELISA Kit 小鼠血管活性腸肽(VIP)檢測試劑盒

Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit 大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGzms-B(MousegranzymesB)ELISAKit小鼠顆粒酶B

細胞二(MDA)比色法定量檢測試劑盒50次

RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit大鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein

ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原

MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白

ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽)

ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原

CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白

IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein

ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽)

MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human rotavirus aigen (RV Ag) ELISA Kit 人輪狀病毒抗原(RV Ag)檢測試劑盒

HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit 人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Duckcarbonicanhydrase,CA檢測試劑盒鴨子酶(CA)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

載玻片細胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測試劑盒(針對二甲基 、基)10/20次

MouseDopamineD1receptor,D1RELISAKit小鼠多巴胺D1受體(D1R)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

人羊膜成纖維細胞小鼠結合蛋白4(RBP-4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠戊糖素(Peosidine)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用