① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：人牙周膜幹細胞

英文名稱 ：Human Periodontal Ligament Stem Cells

組織來源 ：牙周膜組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

人牙周膜幹分離自牙周膜組織 ；牙周膜（牙周韌帶 、牙周間隙）是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束 ，纖維的一端埋於牙骨質內 ，另一端則埋於牙槽窩骨壁裏 ，使牙齒固位於牙槽窩內 ；牙周膜內有神經 、血管 、淋巴和上皮細胞等 。成纖維細胞（Fibroblast）是疏鬆結締組織的主要細胞成分 ，由胚胎時期的間充質細胞分化而來 。間充質幹細胞（mesenchymal stem cells ，MSCs）來源於胚胎時期的中胚層組織 ，具有很強的自我複製和多向分化潛能 ，具有向脂肪細胞 、成骨細胞 、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力 ，運用 MSCs來修複軟骨損傷具有很好的應用前景 ，目前已能夠從骨髓 、脂肪 、滑膜 、骨骼 、肌肉等組織以及羊水 、臍帶 、臍帶血中分離和製備間充質幹細胞 。牙周膜幹細胞參與了牙周組織的病變 、修複及再生過程 。現在 ，利用牙周膜幹細胞建立體外模型 ，已經成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段 。

公司實驗室分離的人牙周膜幹采用膠原酶消化結合差速貼壁法製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的人牙周膜幹經CD44免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

小鼠神經營養素4(mouse -4)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠(mouse NO)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠骨保護素(mouse OPG)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠骨橋素(mouse OPN)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒

HumanNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 人神經生長導向因子Slit2試劑盒 96T/48T 進口分裝

DuckIerleukin2,IL-2試劑盒鴨白介素2(IL-2)試劑盒規格 ：96T/48T

棗椰樹(datepalm)培養基500毫升溶液/片劑

MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit小鼠脫氫表雄同(DHEA)試劑盒規格 ：96T/48T

CA10重組人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein

顆粒酶H(GZMH)重組蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)

VTI1A重組人 VTI1A 蛋白 Protein

CLEC4D Protein Human 重組人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

顆粒酶H(GZMH)重組蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)

CLEC4D Protein Human 重組人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白

CA10重組人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

VTI1A重組人 VTI1A 蛋白 Protein

人牙周膜幹細胞大鼠熱休克轉錄因子1(HSF1)試劑盒  ，英文名 ： HSF1 ELISA Kit

Mouse vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 小鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒

RatAquaporin3,AQP-3ELISAKit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGuineapigierleukin4,IL-4ELISAKit豚鼠白介素4

細胞長鏈脂酰脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量試劑盒20次

Rattyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit大鼠含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激酶2(Tie-2)試劑盒規格 ：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用