① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：人小氣道平滑肌細胞

英文名稱 ：Human Small Airway Smooth Muscle Cells

組織來源 ：小氣道組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

人小氣道平滑肌分離自小氣道組織 ；臨床上通常將內徑小於2mm的小細支氣管稱為小氣道 。小氣道具有氣流阻力小 ，但易阻塞的特點 。在平靜吸氣時 ，空氣進入狹窄的鼻咽部 ，產生渦流 。由於小氣道已無軟骨支持 ，在脫離纖維鞘嵌入肺組織後 ，管腔通暢性不象軟骨性氣道 ，易於受胸腔的壓力變化的影響 。小氣道上皮細胞形成連續呼吸道內層 ，作為隔絕外界有害物質的物理和功能屏障發揮著的作用 。小氣道位於肺泡和氣管的交界處，這些細胞在功能上能夠調節免疫反應 、產生化學因子進行宿主防禦 、表達粘附分子 ，並可能通過HLA-DR表達呈遞抗原 ；它們還能產生液體有助於肺液的平衡 。許多呼吸道疾病 ，如哮喘 、支氣管炎 、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化 ，都涉及呼吸道表麵上皮細胞的破壞 ；小氣道上皮細胞的培養可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇 。小氣道平滑肌細胞原代分離培養3天後 ，可見細胞貼壁伸展 ，細胞形態大小不一 ，呈梭形 、不規則形 、三角形或扇形 ，核卵圓形 、居中 ；2周後細胞匯合 ，多數細胞伸展呈長梭形 ，胞漿豐富 ，有分枝狀突起 ，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長 ，高低起伏 ；細胞密度低時 ，常交織成網狀 ；密度高時 ，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代後細胞生長較快 ，4-6天即可匯合 ，並保持上述形態學特征和生長特點 。小氣道的生理功能特點 ：①小氣道阻力小 ；②氣流速度慢；③可調節控製通氣與血流比例 。小氣管平滑肌細胞主要功能 ：①保持氣道張力維持小氣道形態 ；②肺小氣道進行氣體交換 ，病變可引起換氣功能障礙 ；③炎症 、痰液阻塞或當氣道外壓大於氣道內壓時容易造成小氣道閉合 、萎陷 。小氣管平滑肌細胞與主要病生理變化 ：①支氣管炎 ；②肺氣腫 ；③慢性阻塞性肺疾病 。

公司實驗室分離的人小氣道平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的人小氣道平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右 ；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠調節轉錄肽(CA)檢測試劑盒  ，英文名 ： CA ELISA Kit

Monkey macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit巨噬細胞移動抑製因子(MIF)檢測試劑盒

RatCompleme3,C3ELISAKit 大鼠補體蛋白3(C3)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFSH(mousefollicle-stimulatinghormone)ELISAKit小鼠促卵泡素

細胞還原型(GSH)濃度高效液相色譜定量檢測試劑盒50次

RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

CD53重組小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 標簽) Protein

基質金屬蛋白酶1(MMP1)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)

CD81重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein

IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標簽)

EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

基質金屬蛋白酶1(MMP1)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)

IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標簽)

CD53重組小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 標簽) Protein

EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

CD81重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein

豚鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)檢測試劑盒  ，英文名 ： TGF-β1 ELISA Kit

Human protein kinase A (PKA) ELISA Kit 人蛋白激酶A(PKA)檢測試劑盒

MonkeyMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBMP-6(MouseBonemorphogeneticprotein6)ELISAKit小鼠骨形成蛋白6

細菌氫鉍選擇瓊脂平板50個

rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit兔子神經特異性烯醇化酶(NSE)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

人小氣道平滑肌細胞素   英文名稱 ：   Human Renin   規格 ：      英文縮寫 ：   RN

視網膜母細胞瘤蛋白1   英文名稱 ：   Human Retinoblastoma Protein 1   規格 ：      英文縮寫 ：   RBP1

鬆弛素-2   英文名稱 ：   Human Relaxin-2   規格 ：      英文縮寫 ：   RLN-2

S-100蛋白   英文名稱 ：   S-100protein   規格 ：      英文縮寫 ：   S-100

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用