細胞簡介 ：

人胃癌組織源分離自胃癌組織 ；胃癌（gastric carcinoma）是起源於胃黏膜上皮的惡性腫瘤 ，在我國各種惡性腫瘤中發病率居位 ，胃癌發病有明顯的地域性差別 ，在我國的西北與東部沿海地區胃癌發病率比南方地區明顯為高 。好發年齡在50歲以上 ，男女發病率之比為2:1 。由於飲食結構的改變 、工作壓力增大以及幽門螺杆菌的感染等原因 ，使得胃癌呈現年輕化傾向 。胃癌可發生於胃的任何部位 ，其中半數以上發生於胃竇部 ，胃大彎 、胃小彎及前後壁均可受累 。絕大多數胃癌屬於腺癌 ，早期無明顯症狀 ，或出現上腹不適 、噯氣等非特異性症狀 ，常與胃炎 、胃潰瘍等胃慢性疾病症狀相似 ，易被忽略 ，因此 ，目前我國胃癌的早期診斷率仍較低。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化 、經Percoll離心純化製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的人胃癌組織源經檢測 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形 、多角形

傳代特性 可傳5代左右 ；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠轉化受體電位陽離子通道亞家族M成員6(PM6)檢測試劑盒  ，英文名 ： PM6 ELISA Kit

Mouse ai double sanded DNA aibody / natural aibody DNA (dsDNA) ELISA Kit 小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)檢測試劑盒

Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanLebtospiraIgMELISAKit人鉤端IgM

脘蛋白糖基化分型(glycoform)試劑盒5次

ELISAKitAMA大鼠抗單核細胞抗體

ICAM1重組小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted 0.5mgCCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T細胞表達和分泌的調節因子抗原

UBE2F重組人 UBE2F 蛋白 Protein

HEXA Protein Human 重組人 Hexosaminidase A / HEXA 蛋白 (Subunit A, His 標簽)

CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (Fc 標簽)

CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted 0.5mgCCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T細胞表達和分泌的調節因子抗原

HEXA Protein Human 重組人 Hexosaminidase A / HEXA 蛋白 (Subunit A, His 標簽)

ICAM1重組小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (Fc 標簽)

UBE2F重組人 UBE2F 蛋白 Protein

小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat glucocoicoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 大鼠糖皮質激素受體α(GR-α)檢測試劑盒

Humahyroxine,T4ELISAKit 人甲狀腺素(T4)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancoagulationfactorⅢ,FⅢ檢測試劑盒人Ⅲ(FⅢ)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶6(HDAC6)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人酸誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

人胃癌組織源細胞兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISAkit   ELISA.   96T/48T

兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔(LZM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子催乳素(PRL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。