老哥俱乐部

细胞简介：

人胃癌组织源分离自胃癌组织；胃癌（gastric carcinoma）是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居位

，胃癌发病有明显的地域性差别，在我国的西北与东部沿海地区胃癌发病率比南方地区明显为高
。好发年龄在50岁以上

，男女发病率之比为2:1。由于饮食结构的改变、工作压力增大以及幽门螺杆菌的感染等原因
，使得胃癌呈现年轻化倾向。胃癌可发生于胃的任何部位，其中半数以上发生于胃窦部，胃大弯
、胃小弯及前后壁均可受累。绝大多数胃癌属于腺癌
，早期无明显症状，或出现上腹不适、嗳气等非特异性症状，常与胃炎、胃溃疡等胃慢性疾病症状相似
，易被忽略，因此，目前我国胃癌的早期诊断率仍较低。

方法简介：

公司实验室分离的癌组织源采用胶原酶消化
、经Percoll离心纯化制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶

。

质量检测

公司实验室分离的人胃癌组织源经检测

，纯度可达90%以上

，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS
、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气

，95%
；CO2，5%

实验报告：

一
、分离与培养：

1、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基

，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在室温条件下

，用4% BSA封闭细胞30min；

4

、按1: 100的比例稀释α-actin一抗

，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次
，每次10min

，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员6(PM6)检测试剂盒 ，英文名
： PM6 ELISA Kit

Mouse ai double sanded DNA aibody / natural aibody DNA (dsDNA) ELISA Kit 小鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)检测试剂盒

Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanLebtospiraIgMELISAKit人钩端IgM

脘蛋白糖基化分型(glycoform)试剂盒5次

ELISAKitAMA大鼠抗单核细胞抗体

ICAM1重组小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted 0.5mgCCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T细胞表达和分泌的调节因子抗原

UBE2F重组人 UBE2F 蛋白 Protein

HEXA Protein Human 重组人 Hexosaminidase A / HEXA 蛋白 (Subunit A, His 标签)

CSF1R Protein Rat 重组大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (Fc 标签)

CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted 0.5mgCCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T细胞表达和分泌的调节因子抗原

HEXA Protein Human 重组人 Hexosaminidase A / HEXA 蛋白 (Subunit A, His 标签)

ICAM1重组小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

CSF1R Protein Rat 重组大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (Fc 标签)

UBE2F重组人 UBE2F 蛋白 Protein

小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat glucocoicoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)检测试剂盒

Humahyroxine,T4ELISAKit 人甲状腺素(T4)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumancoagulationfactorⅢ,FⅢ检测试剂盒人Ⅲ(FⅢ)检测试剂盒规格：96T/48T

组蛋白脱乙酰化酶6(HDAC6)活性比色法定量检测试剂盒20次

Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人酸诱导基因/RIG-1样受体(RLR)检测试剂盒规格：96T/48T

人胃癌组织源细胞兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISAkit   ELISA.   96T/48T

兔心肌特异性肌钙蛋白T(c)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔(LZM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子催乳素(PRL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液

、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态

，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。