① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：人輸尿管上皮細胞

英文名稱 ：Human Ureteral Epithelial Cells

組織來源 ：尿道組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

人輸尿管上皮分離自輸尿管組織 ；輸尿管上接腎盂 ，下連膀胱 ，是一對細長的管道 ，呈扁圓柱狀 ，位於腹膜後 ，為一肌肉粘膜所組成管狀結構 ，沿腰大肌內側的前方垂直下降進入骨盆 。輸尿管有三個狹窄部 ：一個在腎盂與輸尿管移行處（輸尿管起始處） ；一個在越過小骨盆入口處 ；後一個在進入膀胱壁的內部 。這些狹窄是結石 、及壞死組織容易停留的部位 。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結構 ，即瓦耳代爾鞘 ，它能有效地防止膀胱內尿液返流到輸尿管 。臨床上將輸尿管分為上 、中 、下三段 ，也可稱為腹段 、盆段、膀胱段 。其中 ，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動脈處 ；盆段 ，自髂動脈到膀胱壁 ；膀胱段 ，自膀胱壁內斜行至膀胱粘膜 、輸尿管開口 。輸尿管管壁分為4層 ，黏膜層 、固有層 、肌層 、外膜 。黏膜層表麵為移行上皮 ，約有4-5層細胞 ；固有層由細密的結締組織構成 ，內含膠原纖維和少量彈性纖維 ；輸尿管肌層主要由內縱和外環兩層平滑肌組成 ；外膜為疏鬆結締組織 ，營養血管由外膜進入輸尿管 。其中，輸尿管上皮細胞主要分布於黏膜層 。

公司實驗室分離的人輸尿管上皮采用先消化 、然後機械分離法使輸尿管分層 、後膠原酶消化 ，並通過上皮細胞專用培養基培養篩選製備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的人輸尿管上皮經PCK免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin）   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠Flt3(mouse Flt3)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)試劑盒

Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用轉錄複合體(GTC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Deererythrocytemembraneprotein,EMP試劑盒紅細胞膜蛋白(EMP)試劑盒規格 ：96T/48T

載玻片細胞脘蛋白(PRION)蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠內皮型合成酶(eNOS)試劑盒規格 ：96T/48T

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein

降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)

CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein

CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白

MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白

降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)

CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein

MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白

CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein

人輸尿管上皮細胞大鼠生長調節致癌基因γ(GROγ)試劑盒  ，英文名 ： GROγ ELISA Kit

Mouse vitamin E (VE) ELISA Kit 小鼠(VE)試劑盒

RatHistamine,HISELISAKit 大鼠組胺(HIS)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHDELISAKit大鼠組織蛋白去乙酰化酶

細胞VEGFR1(FLT-1)激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitα-BGTα-銀環蛇毒素

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用