① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：人卵巢微血管內皮細胞

英文名稱 ：Human Ovarian Microvascular Endothelial Cells

組織來源 ：卵巢組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

人卵巢微血管內皮分離自卵巢組織 ；卵巢是雌性動物的生殖器官 ，卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素 。卵巢的位置與睾丸相同 ，僅左側發育（右側已退化） ，呈葡萄狀 ，均為處於不同發育時期的卵泡 ，卵泡呈黃色 ，卵巢表麵密布血管 。卵巢的大小與年齡和產卵期有關 。大多數脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構 ，而所有鳥類隻有左側卵巢有機能 。卵巢是位於子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官 ，它的外表有一層上皮組織 ，其下方有薄層的結締組織 。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質 。皮質位於卵巢的周圍部分 ，主要由卵泡和結締組織構成 ；髓質位於中央 ，由疏鬆結締組織構成 ，其中有許多血管 、淋巴管和神經 。微血管又稱毛細血管 。分布於各種組織和細胞間的微細的血管 。介於微動脈和微靜脈之間 。平均直徑7～9微米 ，數量極多 ，成網狀分布。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成 ，厚約0.5微米 。基膜外麵有薄層結締組織 ，其中有纖維細胞 、巨噬細胞和周細胞等 。細的微血管由一個內皮細胞圍成管腔 ，較粗的微血管由2～3個內皮細胞圍成 。分布於肌肉組織 、神經組織和結締組織中的微血管 ，內皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃） ，稱連續微血管 。血管內皮細胞在器官和組織的結構和功能上起著非常重要的作用 。並與多種疾病的發生與發展有關 。近年來血管內皮細胞在炎症 、休克等一係列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視 。研究發現，不同來源的內皮細胞在生物學特征 、結構和功能等方麵均存在一定差別 ，而同是微血管內皮細胞 ，它們又存在器官和組織的特異性 。

公司實驗室分離的人卵巢微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法 、後通過內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×105cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的人卵巢微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

包被條件 PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠蛋白激酶Cη(PKCη)檢測試劑盒  ，英文名 ： PKCη ELISA Kit

N end middle Osteocalcin (N-MID-OT) ELISA Kit 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)檢測試劑盒

Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforCXCR3(MouseCXC-chemokinereceptor3)ELISAKIT小鼠CXC趨化因子受體3

細胞色素P450亞酶CYP2E1(MFC)活性熒光定量檢測試劑盒20次

RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKiatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit大鼠IX(FIX)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

FGF21重組小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein

A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽

CANT1重組人 CANT1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

FGFR4 Protein Rat 重組大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白

蛋白激酶Cη(PKCη)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)

CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

NCSTN重組小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein

IL10RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 標簽)

VAMP3重組人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein

小鼠糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ovarian cancer marker-CA125 CA125ELISA 人卵巢癌標誌物CA125檢測試劑盒

Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 人脫氧尿三0酸(DP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickenviruseeritis,DEV檢測試劑盒雞病毒性腸病毒(DEV)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

載玻片細胞VEGF蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

人卵巢微血管內皮細胞小鼠胎盤催乳素   英文名稱 ：   Mouse placeal lactogen   規格 ：      英文縮寫 ：   PL

小鼠纖溶酶原激活劑抑製因子1   英文名稱 ：   Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 1   規格 ：      英文縮寫 ：   PAI-1

小鼠纖溶酶原激活劑抑製因子2   英文名稱 ：   Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 2   規格 ：      英文縮寫 ：   PAI-2

小鼠鬆弛素   英文名稱 ：   Mouse Relaxin   規格 ：      英文縮寫 ：   RLN

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用