細胞簡介 ：

人筋膜成纖維分離自筋膜組織 ；筋膜 ，解剖結構名 。指肌肉的堅韌部分 。附於骨節者為筋 ，包於肌腱外者為膜 。是聯絡關節 、肌肉 ，主 司運動的組織 。為肝所主 ，並賴肝血的滋養 。筋膜是一類結締組織 ，結締組織除了筋膜還有其他表現的形式 ，如腱 、韌帶 、腱膜和疤痕組織 。在不同的地方結締組織也有著不同的名稱 ：腦和脊髓周圍的是腦膜 ；骨周圍是骨膜 ；心髒周圍是心包 ；腹腔內表麵的是腹膜 ；在皮下層包圍整個身體和封閉肌肉和肌群的叫筋膜。筋膜位於肌肉的表麵 ，分為淺筋膜和深筋膜兩種 。（1）淺筋膜位於皮下 ，又稱皮下筋膜 ，由疏 鬆結締組織構成 ，其內含有脂肪 、淺靜脈 、皮神經以及淺淋巴結和淋巴管等 。脂肪的多少因身體部位 、性別和營養狀況不同 。臨床常作的皮 下注射 ，即將藥液注入淺筋膜內 。（2）深筋膜 位於淺筋膜深麵 ，又稱固有筋膜 ，由致密結締組織構成 ，遍於全身且互相連續 。深筋膜包被 肌或肌群 、腺體 、大血管和神經等形成筋膜鞘 。四肢的深筋膜 。伸入肌群之間與骨相連 ，分隔肌群 ，稱肌間隔 。成纖維細胞是結締組織 的主要細胞成分 ，細胞呈梭形或扁的星狀 ，具有突起 。剛分離的成纖維細胞呈圓形 、折光性良好 ，懸浮於培養基中 。30min細胞貼壁 ，其中部分開始伸出偽足 ，表現為小的突起 ；6h後細胞基本貼壁 ，伸展成梭形 ，胞核清晰 ，分布較均勻 ，散在生長 ，不聚集成團 ；細胞生長迅速 ，5-7天即呈融合狀態 ，細胞排列緊密 ，有的交叉重疊生長 ，平坦 、胞體較大 ，細胞質透明 ，細胞核較大 ，呈橢圓形 ，顏色淡 。細胞融合 ，並彼此連接成網狀 ；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布 。

方法簡介 ：

實驗室分離的人筋膜成纖維采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的人筋膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 ：基礎培養基 ，含FBS 、bFGF 、Insulin 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：成纖維細胞樣

傳代特性 ：可傳3代左右

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

人筋膜成纖維體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品：

大鼠蛋白激酶Cθ(PKCθ)檢測試劑盒  ，英文名 ： PKCθ ELISA Kit

N terminal brain naiuretic peptide (-proBNP) ELISA Kit 人N端前腦素(-proBNP)檢測試劑盒

Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAkit 大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforCyclin-D1ELISAKit大鼠細胞周期素D1

細胞色素P450亞酶CYP2E(AH)活性熒光定量檢測試劑盒20次

Ratferritin,FEELISAKit大鼠鐵蛋白(FE)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

MMP9重組人 MMP-9 / CLG4B 蛋白 Protein

拓撲異構酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白 Recombinant Topoisomerase II (TOP2)

XG重組人 Glyco蛋白 Xg / PBDX 蛋白 Protein

CHI3L1 Protein Human 重組人 CHI3L1 / YKL40 蛋白

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Japanese white-eye/Hong Kong/1038/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

拓撲異構酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白 Recombinant Topoisomerase II (TOP2)

CHI3L1 Protein Human 重組人 CHI3L1 / YKL40 蛋白

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小鼠糖皮質類固醇受體(GR)ELISA 試劑盒 96T/48T

The formation of red blood cells of rat prolactin receptor (EPOR) ELISA Kit 大鼠紅細胞生成素受體(EPOR)檢測試劑盒

Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISAKit 人末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickenverylowdensitylipoprotein,VLDL檢測試劑盒雞極低密度脂蛋白(VLDL)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

載玻片細胞TUBULIN蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseErythropoietin,EPOELISAKit小鼠紅細胞生成素(EPO)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

人筋膜成纖維細胞小鼠酶(CA)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠胎盤生長因子(PLGF)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠羧甲基賴酸（CML）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。