① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：人結腸平滑肌細胞

英文名稱 ：Human Colonic Smooth Muscle Cells

組織來源 ：結腸組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

人結腸平滑肌分離自結腸組織 ；結腸在右髂窩內續於盲腸 ，在第3骶椎平麵連接直腸 。結腸分升結腸 、橫結腸 、降結腸和乙狀結腸4部分 ，大部分固定於腹後壁 ，結腸的排列酷似英文字母“M" ，將小腸包圍在內 。結腸橫切麵由內到外依次為 ：黏膜（上皮層 、固有層 、黏膜肌層），黏膜下層（疏鬆結締組織） ，肌層（內環形 、外縱行兩層平滑肌） ，外膜（纖維膜或漿膜） 。結腸平滑肌細胞主要分布於黏膜肌層和肌層的內環形、外縱行平滑肌 ；結腸運動少而緩慢 ，對刺激的反應也較遲緩 。結腸平滑肌在食物消化與吸收 、腸道運動和物質分泌 、誘發全身炎症反應以及細胞內信號轉導途徑等研究中起著重要的作用 。結腸平滑肌細胞原代分離培養3天後，可見細胞貼壁伸展 ，細胞形態大小不一 ，呈梭形 、不規則形 、三角形或扇形 ，核卵圓形 、居中 ；2周後細胞匯合 ，多數細胞伸展呈長梭形 ，胞漿豐富 ，有分枝狀突起 ，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長 ，高低起伏 ；細胞密度低時 ，常交織成網狀 ；密度高時 ，則排列為旋渦狀或柵欄狀 。傳代後細胞生長較快 ，4-6天即可匯合 ，並保持上述形態學特征和生長特點 。結腸平滑肌運動活性受到神經遞質 、胃腸激素和藥物等因素的調節 。隨著現代胃腸動力學研究的進展 ，對胃腸運動的研究已從器官 、組織水平發展到細胞 、分子水平 ，要求在胃腸道單個平滑肌細胞標本上來完成各種電生理 、藥理和分子生物學等實驗 。體外培養細胞 ，由於影響因素單一 ，是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機製的基礎 。

公司實驗室分離的人結腸平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的人結腸平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右 ；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠蛋白激酶N2(PKN2)檢測試劑盒  ，英文名 ： PKN2 ELISA Kit

Na+/H+ exchanger 3 (NHE3) ELISA Kit 人Na+/H+交換體3(NHE3)檢測試劑盒

Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAkit 大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforCyclin-D2ELISAKit大鼠細胞周期素D2

細胞色素P450亞酶CYP2C9(CEC)活性熒光定量檢測試劑盒20次

RatFibrinogen,FbgELISAKit大鼠血纖蛋白原(Fbg)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

FIGF重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ets1/E26 (E-twenty six 1 0.5mgets1/E26 (E-twenty six 1) Ets轉錄因子家族ets1抗原

IL12A & IL12B重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

CHEK1 Protein Human 重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標簽)

CTSE Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白

ets1/E26 (E-twenty six 1 0.5mgets1/E26 (E-twenty six 1) Ets轉錄因子家族ets1抗原

CHEK1 Protein Human 重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標簽)

FIGF重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CTSE Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白

IL12A & IL12B重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 人硫氧還蛋白還原酶(xR)檢測試劑盒

Humanindoleamine2,3-dioxygenase,IDOELISAKit 人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGF檢測試劑盒雞血管內皮細胞生長因子(VEGF)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

載玻片細胞TSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseE-SelectinELISAKit小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

人結腸平滑肌細胞小鼠糖皮質激素   英文名稱 ：   glucocoicoid   規格 ：      英文縮寫 ：   GC

膠質細胞源神經營養因子   英文名稱 ：   glial cell line-derived neuoophic factor   規格 ：      英文縮寫 ：   GDNF

小鼠生長因子   英文名稱 ：   growth hormone   規格 ：      英文縮寫 ：   GH

小鼠心肌轉錄因子GATA3   英文名稱 ：   cardiac muscle anscription factor GATA3   規格 ：      英文縮寫 ：   GATA3

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用