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以下是Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞
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细胞名称  Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞
；231-Cas9-547品牌
形态特性 上皮样

生长特性 贴壁生长

特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418

传代方法 1:2~1:4传代
；每周2~3次
。

传代情况 C3

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

​

【培养指南】
Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-547品牌对于贴壁细胞
，传代可参考以下方法

：
1. 弃去培养上清
，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基
，轻轻打匀后吸出
，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀
。
4. 将细胞悬液按1：2到1
：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中
。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟
，弃去上清液
，补加1-2mL培养液后吹匀
，将细胞悬液按1
：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起
，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中
。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-547品牌冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量
，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中


，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时
，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃
，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货
，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

细胞分类：
*种：
Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-547品牌是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不这种

，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行

，还是复苏没操作好

；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大
，也不是细胞储存的方式，快递时间也很难控制
，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是老哥俱乐部复苏好细胞，QC通过后
，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响

，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：老哥俱乐部的细胞株来源于ATCC

、ECACC
、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由老哥俱乐部实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测
，进口来源，保证5代以内，活力>95%，无细菌
、真菌、支原体污染。
Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-547品牌现货供应
，质量有保证、*、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书
、规格
、用途
、实验原理等相关操作说明
。
250克Casein Agar Medium水解酪蛋白琼脂

250克Ammonium Dextrose Medium葡萄糖铵培养基

250克Dextrose Semisolid Medium葡萄糖半固体发酵管

250克Kilgler Iron Agar克氏双糖铁琼脂

250克Phosphate Glucose Peptone Water磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基

100克Korser Citrate Sodium BrothKORSER氏柠檬酸盐肉汤

250克VRBA结晶紫中性红胆盐琼脂

250克Salmonella Arizona AgarSA琼脂

TFAR19/PDCD5  凋亡相关蛋白5抗体   规格 0.1ml*

Tetraspan 5  四分子交联体5抗体   规格 0.1ml*

Tetranectin/CLEC3B/TNA  四连接素TN抗体   规格 0.2ml*

Tetracycline  四环素抗体   规格 0.2ml*

TET2  甲基双加氧酶TET2抗体   规格 0.2ml*

TET1/CXXC6  Ten-eleven转运基因1蛋白抗体   规格 0.2ml*

Testis  肿瘤抑制基因Testin抗体   规格 0.2ml*

TERT/EST2/Telomerase reverse transcriptase  端粒酶相关蛋白2抗体（端粒酶逆转录酶）   规格 0.2ml*

TERT  端粒酶逆转录酶抗体   规格 0.1ml*

TEP1  端粒酶相关蛋白1抗体   规格 0.2ml*

Tenascin C/Tn-C  细胞粘合素(固生蛋白)抗体   规格 0.1ml*

Tenascin C (C terminal)  细胞粘合素抗体(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)抗体   规格 0.1ml*
Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞
；231-Cas9-547品牌Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy7  Cy7标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5.5  Cy5.5标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5  Cy5标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3  Cy3标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio  标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/APC  APC标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的小鼠抗兔IgM   规格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM  小鼠抗兔IgM   规格 1mg*