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細胞名稱  Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞 ；231-Cas9-547品牌
形態特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo ，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆 ，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白 ，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA 。

培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS ；400ug/ml G418

傳代方法 1:2~1:4傳代 ；每周2~3次 。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

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【培養指南】
Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞 ；231-Cas9-547品牌對於貼壁細胞 ，傳代可參考以下方法 ：
1. 棄去培養上清 ，用不含鈣 、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次 。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於培養瓶中 ，置於37℃培養箱中消化1-2分鍾 ，然後在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況 ，若細胞大部分變圓並脫落 ，迅速拿回操作台 ，輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化 。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基 ，輕輕打勻後吸出 ，在1000RPM條件下離心4分鍾 ，棄去上清液，補加1-2mL培養液後吹勻 。
4. 將細胞懸液按1 ：2到1 ：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中 。
對於懸浮細胞 ，傳代可參考以下方法 ：
方法一 ：收集細胞 ，1000RPM條件下離心4分鍾 ，棄去上清液 ，補加1-2mL培養液後吹勻 ，將細胞懸液按1 ：2到1 ：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中 。
方法二 ：可選擇半數換液方式 ，棄去半數培養基後 ，將剩餘細胞懸起 ，將細胞懸液按1 ：2到1 ：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中 。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態良好時 ，可進行Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞 ；231-Cas9-547品牌凍存 。貼壁細胞凍存時 ，棄去培養基後加入少量 ，細胞變圓脫落後 ，加入約1ml含血清的培養基後加入凍存管中 ，再添加10%DMSO後進行凍存 。懸浮細胞凍存時 ，應將細胞收集 ，1000RPM條件下離心4分鍾 ，少量保存上清液(防止細胞吸走) ，加入部分新鮮培養基 ，加入到凍存管中 ，在凍存管中加入10%DMSO後進行凍存 。
【複蘇的原則】
快速融化 ：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃ ，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化 ，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶 ，對細胞造成損害 。複旦細胞庫全國各地均可發貨 ，全國統一價格 ，本公司出售的所有細胞僅供科研使用 。

細胞分類 ：
*種 ：
Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞 ；231-Cas9-547品牌是凍存產品 ，由氮直液接拿出 ，幹冰運輸給客戶 。一般不這種 ，也較少使用這種方式 ，因為複蘇手法對於細胞狀態影響較大 ，一旦細胞狀態不好 ，很難說是細胞自身不行 ，還是複蘇沒操作好 ；另外溫度對細胞 、基因功能狀態影響很大 ，也不是細胞儲存的方式 ，快遞時間也很難控製 ，多種因素影響產品的質量 ；幹冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐) 。
第二種 ：
是老哥俱樂部複蘇好細胞 ，QC通過後 ，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶 ，排除複蘇造成影響 ，常溫運輸也對細胞影響也不大 ，隻需加25元運費(順豐) 。
質量保證 ：老哥俱樂部的細胞株來源於ATCC 、ECACC 、DSMZ 、JCRB等 ，購買到貨後 ，由老哥俱樂部實驗室擴增 、凍存 ，凍存的產品全部經過QC檢測 ，進口來源 ，保證5代以內 ，活力>95% ，無細菌 、真菌 、支原體汙染。
Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞 ；231-Cas9-547品牌現貨供應 ，質量有保證 、* 、實驗效果好 ，我司為您提供免費代測服務 ，同時提供價格 、說明書 、規格 、用途 、實驗原理等相關操作說明 。
250克Casein Agar Medium水解酪蛋白瓊脂

250克Ammonium Dextrose Medium葡萄糖銨培養基

250克Dextrose Semisolid Medium葡萄糖半固體發酵管

250克Kilgler Iron Agar克氏雙糖鐵瓊脂

250克Phosphate Glucose Peptone Water磷酸鹽葡萄糖蛋白腖水培養基

100克Korser Citrate Sodium BrothKORSER氏檸檬酸鹽肉湯

250克VRBA結晶紫中性紅膽鹽瓊脂

250克Salmonella Arizona AgarSA瓊脂

TFAR19/PDCD5  凋亡相關蛋白5抗體   規格 0.1ml*

Tetraspan 5  四分子交聯體5抗體   規格 0.1ml*

Tetranectin/CLEC3B/TNA  四連接素TN抗體   規格 0.2ml*

Tetracycline  四環素抗體   規格 0.2ml*

TET2  甲基雙加氧酶TET2抗體   規格 0.2ml*

TET1/CXXC6  Ten-eleven轉運基因1蛋白抗體   規格 0.2ml*

Testis  腫瘤抑製基因Testin抗體   規格 0.2ml*

TERT/EST2/Telomerase reverse transcriptase  端粒酶相關蛋白2抗體（端粒酶逆轉錄酶）   規格 0.2ml*

TERT  端粒酶逆轉錄酶抗體   規格 0.1ml*

TEP1  端粒酶相關蛋白1抗體   規格 0.2ml*

Tenascin C/Tn-C  細胞粘合素(固生蛋白)抗體   規格 0.1ml*

Tenascin C (C terminal)  細胞粘合素抗體(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)抗體   規格 0.1ml*
Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞 ；231-Cas9-547品牌Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy7  Cy7標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5  Cy5標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3  Cy3標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio  標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/APC  APC標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的小鼠抗兔IgM   規格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM  小鼠抗兔IgM   規格 1mg*