ELISA 試驗時 ，注意事項如下 ： 
     1. 正式試驗時 ，應分別以陽性對照與陰性對照控製試驗條件 ，待檢樣品應作一式二份 ，以保證實驗結果的準確性 。有時本底較高 ，說明有非特異性反應 ，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉 。 
     2. 在ELISA中 ，進行各項實驗條件的選擇是很重要的 ，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇 ：許多物質可作為固相載體 ，如聚氯乙烯 、聚苯乙烯 、聚丙酰胺和纖維素等 。其形式可以是凹孔平板 、試管 、珠粒等 。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板 。不管何種載體 ，在使用前均可進行篩選 ：用等量抗原包被 ，在同一實驗條件下進行反應 ，觀察其顯色反應是否均一性 ，據此判明其吸附性能是否良好 。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇 ：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表麵時 ，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間 。吸附溫度 ，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時 。蛋白質包被的適濃度需進行滴定 ：即用不同的蛋白質濃度（0.1 、1.0和10μg／ml等）進行包被後，在其它試驗條件相同時 ，觀察陽性標本的OD值 。選擇OD值大而蛋白量少的濃度 。對於多數蛋白質來說通常為1～10μg／ml 。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇 ：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份） 。然後再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物 、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗係統裏準確地滴定其工作濃度 。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇 ：對供氫體的選擇要求是價廉 、安全 、有明顯地顯色反應 ，而本身無色 。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用 ，應注意防護 。有條件者應使用不致癌 、靈敏度高的供氫體 ，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體 。底物作用一段時間後 ，應加入強酸或強堿以終止反應 。通常底物作用時間 ，以10-30分鍾為宜 。底物使用液必須新鮮配製 ，尤其是H2O2在臨用前加入  。

產品名稱 ：PSTAT6ELISA檢測試劑盒
英文名稱 ：PSTAT6
產品貨號 ：EY-E99053
產品規格 ：48T/96T
產品保存 ：2-8℃ ，有效期6個月
主要組成成分 ：試劑 
    性狀 ：液體 
    產品規格 ：96T/48T 
    96T指可以做94個標本 ，2個標準對照 
    48T指可以做47個標本 ，1個標準對照 
    96T-84個樣本 
    48T-42個樣本 
    待檢樣本 ：體液 ，血清 ，血漿 ，細胞培養上清液 ，尿液 ，組織勻漿,心房水標本等等 。 

樣品收集 、處理及保存方法
1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激 。使用不含熱原和內毒素的試管 。收集血液後 ，1000×g離心10分鍾將血清和紅細胞迅速小心地分離 。
2）血漿-----EDTA 、檸檬酸鹽 、肝素血漿可用於檢測 。1000×g離心30分鍾去除顆粒 。
3）細胞上清液---1000×g離心10分鍾去除顆粒和聚合物 。
4）組織勻漿-----將組織加入適量鹽水搗碎 。1000×g離心10分鍾 ，取上清液
5）保存------如果樣品不立即使用 ，應將其分成小部分-70 ℃保存 ，避免反複冷凍 。盡可能的不要使用溶血或高血脂血 。如果血清中大量顆粒 ，檢測前先離心或過濾 。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍 。
注意事項
1）試劑應按標簽說明書儲存 ，使用前恢複到室溫 。稀稀過後的標準品應丟棄 ，不可保存 。
2）實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中 ，密封保存 ，以免變質 。
3）不用的其它試劑應包裝好或蓋好 。不同批號的試劑不要混用 。保質前使用 。
4）使用一次性的吸頭以免交叉汙染 ，吸取終止液和底物A 、B液時 ，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
5）使用幹淨的塑料容器配置洗滌液 。使用前充分混勻試劑盒裏的各種成份及樣品 。
6）洗滌酶標板時應充分拍幹 ，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水 。
7）底物A應揮發 ，避免長時間打開蓋子 。底物B對光敏感 ，避免長時間暴露於光下 。避免用手接觸 ，有毒 。實驗完成後應立即讀取OD值 。
8）加入試劑的順序應一致 ，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣 。
9）按照說明書中標明的時間 、加液的量及順序進行溫育操作 。

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