① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：人肝癌相關成纖維細胞

英文名稱 ：Human primary liver cancer associated fibroblasts;CAFs

組織來源 ：肝癌組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

細胞簡介 ：

肝癌是一種惡性程度 ，預後極差的惡性腫瘤 ，雖然現代新的腫瘤化療 、生物和手段非常多 ，但由於其早期診斷率低 、術後複發率高而預後差 。化療是目前肝癌的主要輔助手段之一 。

腫瘤相關成纖維細胞是腫瘤微環境中主要的細胞成分之一 ，在惡性腫瘤的發生 、發展中起著重要作用 。

細胞特性 ：

1）細胞來源於人肝癌組織 。

2)細胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性 。

3)經鑒定細胞純度高於90% 。

4)不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。

5)細胞生長方式 ：梭形細胞 ，貼壁培養 。

推薦培養基 ：

老哥俱樂部推薦使用 delf 原代成纖維細胞培養體係 作為體外培養的培養基 。

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

小鼠仙台病毒抗體(HVJ-Ab)檢測試劑盒

Rat bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)檢測試劑盒

Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit 人非神經元性烯醇化酶(NNE)檢測試劑盒 進口分裝

ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70檢測試劑盒雞熱休克蛋白70(HSP-70)檢測試劑盒

載玻片細胞CDK3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒

IL2RA重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (His 標簽) Protein

Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor 0.5mgKiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 轉移抑製基因(抗原)

CDON重組人 CDON / CDO 蛋白 (His 標簽) Protein

ABHD10 Protein Human 重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標簽)

EGFR Protein Mouse 重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白

Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor 0.5mgKiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 轉移抑製基因(抗原)

ABHD10 Protein Human 重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標簽)

IL2RA重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (His 標簽) Protein

EGFR Protein Mouse 重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白

CDON重組人 CDON / CDO 蛋白 (His 標簽) Protein

魚糖胺聚糖(GAG)ELISA檢測試劑盒

Human ai thyroglobulin aibody (ATGA/TGAB) ELISA Kit 人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)檢測試劑盒

PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 豬血管生成素1(ANG-1)檢測試劑盒 進口分裝

ADVIgG腺病毒IgG混合型(間接法二步法)

血液乙醇脫氫酶III活性比色法定量檢測試劑盒20次

MousesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)檢測試劑盒

人肝癌相關成纖維細胞魚類狀腺原酸(T3)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚類(Coisol)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚類甲狀腺素(T4)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用