老哥俱乐部

产品名称：14-3-3thetaELIS检测试剂盒
英文名称：14-3-3theta
产品货号：EY-E97567
产品规格：48T/96T
产品保存
：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分
：试剂 
    性状：液体 
    产品规格
：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本
，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清
，血浆，细胞培养上清液
，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离

。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒
。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血
。如果血清中大量颗粒
，检测前先离心或过滤
。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温
。稀稀过后的标准品应丢弃
，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存
，以免变质
。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用
。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染
，吸取终止液和底物A、B液时
，避免使用带金属部分的加样器
。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品
。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
。
7）底物A应挥发
，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下
。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值
。
8）加入试剂的顺序应一致
，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间
、加液的量及顺序进行温育操作。

草鱼胚胎细胞细黄链霉菌 Streptomyces microflavus

葡萄糖胰蛋白胨琼脂/葡萄糖胰酪胨琼脂/DTA培养基/Dextrose Tryptone Agar嗜热菌芽孢（需氧芽孢总数
、平酸芽孢和厌氧芽孢）分离培养250克国产/进口

小鼠肝星形细胞*培养基100mL

人脑动脉血管内皮细胞*培养基MDA-MB-435(人腺高转移细胞)

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)重组蛋白Recombinant Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand (TRAIL)

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

NCI-H838(人非小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2

小鼠垂体瘤细胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

人心肌成纤维细胞*培养基100mL

小鼠肥大细胞细胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

Antibody-Biotin DiluentBiotin/标记抗体稀释液(黄色)20ml国产

14-3-3thetaELIS检测试剂盒大鼠c-fos大鼠c-fos ELISA Kit 96T

兔血管生成素2ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit 96T

植物生长激素Plant growth hormone,GH ELISA Kit  96T

人肝素结合性表皮生长因子HB-EGF(Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor) ELISA Kit 96T

植物凝脂酸Plant phosphatidic acid,PA ELISA Kit  96T

大鼠c-jun ELISA Kit大鼠c-jun ELISA Kit  96T

小鼠氧化型Mouse oxidizided glutathione,GSSG ELISA Kit 96T

人红细胞刺激因子ESF(Human erythropoiesis stimulating factor) ELISA Kit 96T

大鼠血管紧张素ⅡANG- II (Rat angiotension II ) ELISA Kit 96T

小鼠还原型Mouse reduced glutathione,GSH ELISA Kit 96T

植物吲哚Plant Indole-3-acetic acid ,IAA ELISA Kit 96T

ELISA 试验时

，注意事项如下： 
     1. 正式试验时

，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高
，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择
：许多物质可作为固相载体
，如聚氯乙烯、聚苯乙烯
、聚丙酰胺和纤维素等
。其形式可以是凹孔平板、试管

、珠粒等
。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选
：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性
，据此判明其吸附性能是否良好
。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时
，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时
，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度

。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择

：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物
、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择

：对供氢体的选择要求是价廉
、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护
。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应

。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制
，尤其是H2O2在临用前加入 。