老哥俱乐部

细胞简介：

甲状旁腺是和甲状腺毗邻的一个重要的器官，正常人一般是 4个
，但是每个人由于个体差异不同，具体的数目可能有变异。甲状旁腺主要是分泌甲状旁腺。

细胞特性
：

1）细胞来源于人正常甲状腺旁腺组织
。

2）细胞鉴定：PTH荧光染色为阳性。

3）经鉴定细胞纯度高于90%


。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体
、
、酵母和
。

5）细胞生长方式
：梭形，多角形细胞
，贴壁培养。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 delf原代 上皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

实验报告：

一
、分离与培养

：

1、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min

，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3

、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液

，混悬10s
，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ 

，5％CO2 培养箱中培养

；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好

，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基
、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

大鼠髓鞘关联糖蛋白(MAG)检测试剂盒 ，英文名
： MAG ELISA Kit

Mouse glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)检测试剂盒

raesistinELISAKit 大鼠抵抗素(Resistin)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforHIT(Humanheparinassociatedaibody)ELISAKit人抗肝素PF4复合物抗体/HIT抗体

细胞RCT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKit5-大鼠5核苷酸酶

FCGR2重组小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated Protein

ADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原

TFAP2C重组人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 标签) Protein

FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签)

CD14 Protein Rat 重组大鼠 CD14 蛋白

次0酸核糖基转移酶1(HPRT1)重组蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)

FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签)

S100A9重组小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 标签) Protein

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 标签)

ALOX15B重组人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein

小鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA 试剂盒

Human aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 人水通道蛋白1(AQP-1)检测试剂盒

HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 人Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)检测试剂盒 进口分装

Humanapelin12,AP12检测试剂盒人apelin12(AP12)ELISAKi

植物氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒50次

HumaotalproteinS,TPSELISAKit人总蛋白S(TPS)检测试剂盒

人甲状旁腺细胞小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit   ELISA. 

小鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA. 

小鼠交联物(PY)ELISAKit   ELISA. 

小鼠骨桥素(OPN)ELISAKit   ELISA.