細胞簡介 ：

股動脈是下肢動脈的主幹 ，由髂外動脈延續而來 。在腹股溝韌帶中點的深麵入股三角 。在股三角內 ，股動脈先位於股靜脈的外側 ，逐漸從外側跨到股靜脈的前方 ，下行入收肌管 ，再穿收肌腱裂孔至膕窩 ，易名膕動脈 。

股動脈在腹股溝中點處位置表淺 ，可摸到搏動 ，是臨床上急救壓迫止血和進行穿刺的部位 。股動脈動脈內皮細胞組成了動脈內壁 ，並持續受到血流剪切應力的影響 。內皮細胞在切應力的作用下 ，分泌不同的內皮因子並進而影響血管收縮和生長 。

主動脈內皮細胞也調節細胞黏附分子的表達來控製和精確調節炎症反應和組織纖維化 。體外培養的原代股動脈內皮細胞可有效地幫助研究者研究內皮功能失調的機理 ，動脈粥樣化等的發病機理以及發展新的方法 。

細胞特性 ：

1）組織來源於實驗動物的正常股動脈組織 。

2)細胞鑒定 ：血管假性血友病因子（vWF）熒光染色為陽性 。

3)經鑒定細胞純度高於90% 。

4)不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。

5)細胞生長方式 ：鋪路石狀細胞 ，不規則細胞 ，貼壁培養 。

推薦培養基 ：

老哥俱樂部推薦使用 DELF 原代 內皮 細 胞培養體係 作為體外培養的培養基 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。

公司正在出售的產品 ：

LZM測試盒帶標準 30管/28樣 比濁法

大鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)elisa檢測試劑盒

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人核心結合因子α1,CBFA1/RUNX2 elisa分析檢測試劑盒

體外非細胞係統細胞色素P450亞酶4F3B（LEUKOTRINE B4）

體液L－乳酸比色法定量檢測試劑盒

犬β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa檢測試劑盒

大鼠2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa分析檢測試劑盒

小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)elisa檢測試劑盒

衰變加速因子CD55抗體 CD55

絲/蘇蛋白激酶SIK3抗體 SIK3

PE-Cy5標記小鼠CD38單克隆抗體 mouse CD38/PE-Cy5

PE標記人CD23單克隆抗體 human CD23/PE

組蛋白去乙酰化酶4重組兔單克隆抗體 HDAC4

17β羥基類固醇脫氫酶12/17β-HSD12抗體 HSD17B12

紅色熒光蛋白單克隆抗體 RFP

環指蛋白62抗體 RNF62/MKRN2

鋅指蛋白924抗體 ZBTB41

五肽抗體 TP-5/Thymopentin

促黃體素β亞單位重組兔單克隆抗體 LHB

蛋亞碸還原酶B2抗體 MSRB2

Endokinin-C抗體 Endokinin-C

FAM198B蛋白抗體 FAM198B

磷酸化糖原合酶激酶3α抗體 Phospho-GSK3A (Ser21)

卵黃狀黃斑病蛋白4抗體 Bestrophin 4

組織SPHK激酶總活性比色法定量檢測試劑盒（510）

MAPK/ERK激酶3重組兔單克隆抗體

MEKK3

1號染色體開放閱讀框123抗體

兔股動脈內皮細胞C1orf123