老哥俱乐部

ELISA 试验时
，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件
，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高

，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体
，如聚氯乙烯、聚苯乙烯
、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板
。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好
。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择
：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度
，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时
。蛋白质包被的适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度

。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml
。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）
。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度

。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全

、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护
。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间
，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。

产品名称
：乙醇脱氢酶2ELISA检测试剂盒
英文名称
：Alcohol dehydrogenase 2
产品货号：EY-E98525
产品规格：48T/96T
产品保存
：2-8℃
，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状
：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液
，血清，血浆，细胞培养上清液
，尿液，组织匀浆,心房水标本等等
。 

样品收集
、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离
。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻
。尽可能的不要使用溶血或高血脂血
。如果血清中大量颗粒
，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中
，密封保存
，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用
。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染
，吸取终止液和底物A、B液时
，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液
。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品
。
6）洗涤酶标板时应充分拍干
，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下
。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作

。

phospho-A/AC(Ser428)  磷酸化A抗体 规格: 0.1mlPhospho-BTK/BPK(Tyr223)  磷酸化蛋白激酶ATK抗体 规格: 0.1ml*

PAFAH2/Lp-PLA2  脂蛋脂酶A2抗体 规格: 0.1mlphospho-CRK (Ser41)  磷酸化CRK抗体 规格: 0.1ml*

Mouse Anti-Goat IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的小鼠抗羊IgG 规格: 0.1mlPhospho-Wee1(Ser123)  磷酸化WEE1蛋白抗体 规格: 0.1ml*

phospho-IRS1(Ser332/336)  磷酸化胰岛素受体底物-1抗体 规格: 0.1mlphospho-APP/ABPP(Thr743)  磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体 规格: 0.1ml*

Cdc25A  细胞周期蛋白25抗体 规格: 0.1mlSTEAP1  前列跨膜上皮1抗原抗体 规格: 0.2ml*

Rabbit Anti-rat IgG/Cy5  Cy5标记的兔抗大鼠IgG 规格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗兔IgG 规格: 0.1ml*

VWF  管假性友病因子/管性友病因子抗体 规格: 0.1mlNogo R  轴索过度生抑制因子受体/Nogo受体抗体 规格: 0.1ml*

ETK/BMX  非受体性蛋白激酶ETK抗体 规格: 0.1mlP2RX4  三磷酸苷门控阳离子通道蛋白抗体 规格: 0.2ml*

phospho-Beta-catenin(Tyr86)   磷酸化β 连环素蛋白抗体 规格: 0.1ml*

Goat Anti-rat IgG/Bio  标记的羊抗大鼠IgG 规格: 0.1ml*

phospho-CDKN2A/P16 (Ser8)  磷酸化抑基因p16抗体 规格: 0.1ml*

Ube2N/UBC13  泛素蛋白连接酶2N抗体 规格: 0.2ml*

IFNA17/Interferon alpha 17/IFNA88  干扰素α17抗体 规格: 0.2ml*

LALBA/alpha Lactalbumin  清蛋白α抗体 规格: 0.1ml*

Histone H3 (mono methyl K79)  单甲基组蛋白H3K9抗体 规格: 0.2ml*

乙醇脱氢酶2ELISA检测试剂盒BALA/C 3T3小鼠胚胎成纤维细胞1ml/T75

Psi2 DAP小鼠胚胎成纤维细胞1ml/T75

BALB/3T3clone A31小鼠胚胎成纤维细胞1ml/T75

C3H/10T1/2
，Clone8小鼠胚胎成纤维细胞1ml/T75

SC-1小鼠胚胎细胞1ml/T75

G1发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞1ml/T75

F9小鼠畸胎瘤细胞1ml/T75

BNL CL.2小鼠胚胎肝细胞1ml/T75

MA782/5S-8101小鼠癌细胞1ml/T75

GR-M小鼠癌细胞1ml/T75

CCC-Ca761-03小鼠癌细胞1ml/T75

C127小鼠肿瘤细胞1ml/T75

U14-GFP小鼠颈癌细胞1ml/T75

TM3小鼠间质细胞1ml/T75