老哥俱乐部

细胞简介

：

甲状腺是人体大的腺。棕红色
，分左右两叶，中间相连


，呈 H形。甲状腺滤泡是甲状腺的基本结构单位。此外，甲状腺中以及外围还有部分结缔组织，这些结缔组织是由成纤维细胞组成
，对滤泡起到保护作用。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常甲状腺组织
。

2)细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV、支原体、、酵母和
。

5)细胞生长方式：长梭形细胞
，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 DELF原代 成纤维 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

实验报告
：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s

，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗

，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

人肝脏甘油三脂脂肪酶(HTGL)elisa检测试剂盒免费代测

犬CC趋化因子受体2(CCR2)elisa分析检测试剂盒

植物丙二醛（MDA）比色法定量检测试剂盒

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PE标记人CD269 (BCMA)单克隆抗体 human CD269 (BCMA)/PE

组蛋白去乙酰化酶6重组兔单克隆抗体 HDAC6

17β羟类固醇脱氢酶7抗体 HSD17B7

红细胞蛋白Ank1抗体 Ankyrin-1

环指蛋白70抗体 RNF70

锌指蛋白93抗体 ZNF93

雄受体单克隆抗体

促甲状腺素β亚单位抗体 TSHB

蛋白BOC抗体 Protein BOC

ENOX1蛋白抗体 ENOX1

FAM19A3蛋白抗体 FAM19A3

磷酸化糖原合酶激酶3β抗体 phospho-GSK-3 Beta (Ser21)

磷酸化转录中介因子Tif1β抗体 phospho-TRIM28 (Ser473)

NADP磷酸酶（NADPase）测试盒

病毒受体相关蛋白4抗体 Nectin 4

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小鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)elisa检测试剂盒

小鼠甲状腺成纤维细胞植物类黄酮测试盒

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息

，如细胞形态、所用培养基
、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min

，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。