操作較冗雜,在操作中應留意以下5個方麵 。
1. 跟著病情的發展或由別的要素影響 ，某些抗體在機體內的含量發生大幅動搖 ，因此有必要對標本進行預處理 。直接法測定中 ，標本恰當稀釋還可下降非特異性反響 。

2. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議試驗成敗的一個關鍵過程 。意圖是除掉未的免疫反響物 ，停止抗原抗體反響 ，除掉標本中與反響無關的成分 、遊離的酶標物以及反響過程中吸附於固相載體上的非特異性物質 。可用洗板機洗板或手藝洗板 ，前者洗刷質量較好 ，各反響孔洗刷作用均一 ，批內 、批間區別小 ，手藝洗板應留意操控各孔洗刷作用 ，區別不宜太大 。

3. 斷定成果須運用ELISA試劑盒測讀儀 ，比色法判讀可選擇單波長或雙波長 ，依據反響液色彩的不一樣選用不一樣波長的濾光片 ，以空白孔校零測定反響孔的吸光度值。酶標儀具有傑出的重複性 。

4. 加樣通常運用加液器 ，在ELISA試劑盒中通常有4次加樣 ：加標本 、加酶物 、加底物和加停止液 。加標本時必須每份標本運用一支移液器吸嘴 ，避免交叉汙染 。加酶物 、底物和停止液時則不需更換吸嘴 。

5. 在成批手藝檢查中 ，還應留意操作時差的影響 。加樣及混勻時刻的區別 ，使抗原抗體反響和酶促反響時刻不一致 ，對競爭法及定量檢查影響很大 ，不留意可能會致使錯誤成果或定量不準 。

測定過程 ：固相包被→加待測樣品→溫育→洗刷+加酶標物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加停止液→比色→斷定成果 。
Human    CD111 / Nectin-1 / PVRL1 鼠單抗 (PE)     FCM       PVRL1     MAb
Human    CD27 / TNFRSF7 鼠單抗 (FITC)     FCM       CD27     MAb
Human    Cadherin-12 / CDH12 鼠單抗 (PE)     FCM       CDH12     MAb
Human    JAM-A / F11R 鼠單抗 (PE)     FCM       F11R     MAb
Human    FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 鼠單抗 (PE)     FCM       FAS     MAb
Human    CD146 / MCAM 鼠單抗 (PE)     FCM       MCAM     MAb
Human    CD9 鼠單抗 (PE)     FCM       CD9     MAb

 

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