一 、實驗中抗體的結構
抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白 (immunoglobulin,Ig) 。Ig 分五類 ，即IgG 、IgA  、IgM 、IgD 和IgE 。與免疫測定有關的Ig 主要為 IgG 和IgM 。Ig 由兩個輕鏈(L)和兩個重鏈(H)的單體組成 。Ig 的輕鏈是相同的 ，有κ(kappa)和λ(Lambda )兩種型別 。五類Ig 的重鏈結構不同 ，這決定了它們的抗原性也不同 。IgG 和IgM 的重鏈分別稱為γ(gamma )鏈和μ(mu )鏈 。重鏈和輕鏈的 N 端的氨基酸排列順序因各種抗體而異 ，稱為可變區 ，分別用VH 和VL 表示 。兩者構成抗體的抗原結合部位 ，隻與相應的抗原決定簇匹配 ，發生特異性結合 ，是抗體專一性結合抗原的結構基礎 。
IgG 可被木瓜蛋白酶分解為三個區段 ，其中兩個相同的區段稱抗原結合片段(Fab ) 。每個Fab 都保存結合抗原的能力 ，但隻有一個抗原結合位點 ，是單價的 ，與抗原結合後不出現凝集或沉澱 。另一區段稱Fc 段 ，無抗體活性 ，但具有IgG *的抗原性 。
IgG 可被分解為兩個片段 ，一個Fab 雙體 ，稱F(ab’)2 ，能和兩個相同的抗原結合;另一片段類似Fc ，隨後被分解成小分子多肽 ，無生物活性 。
IgM 是由五個單體組成的五聚體 ，含 10 個重鏈和10 個輕鏈 ，具有10 個抗原結合價 ，由於空間位置的影響 ，隻表現為五個抗原結合價 。IgM 分子量約為900000 ， IgG 分子量約為150000  。
機體被微生物感染後 ，先產生 IgM 抗體 ，然後產生IgG 抗體 。經過一段時間 ，IgM 抗體量逐漸減少而消失 ，而IgG 抗體可存在 ，在疾病*後可持續數年之久 。IgM 抗體一般為保護性抗體具有免疫性 。因此IgM 抗體的測定 ，對某些傳染病如甲型肝炎有較高的臨床診斷價值 。右圖為為甲型肝炎病人血清中IgG 抗體和IgM 抗體出現的時間和水平 。
二 、 抗原抗體反應
2.1 可逆性
Ag·Ab 的解離程度與K 值有關 。高親和力抗體的抗原結合點與抗原的決定簇在空間構型上非常適合 ，兩者結合牢固 ，不易解離 。解離後的抗原或抗體均能保持原有的結構和活性 ，因此可用親和層析法來提純抗原或抗體 。在抗血清中 ，特異性的IgG 抗體僅占總IgG 中的極小部分 。用親和層析法提取的特異性抗體 ，稱為親和層析純抗體 ，應用於免疫測定中可得到更好的效果 。
2.2 zui適比例
在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體複合物(沉澱)的量見圖1-4 。曲線的高峰部分是抗原抗體比例zui合適的範圍，稱為等價帶(zone of equivalence ) 。在等價帶前後分別為抗體過剩帶和抗原過剩帶 。
如果抗原或抗體極度過剩 ，則無沉澱物形成 ，在免疫測定中稱為帶現象(zone phenomenon ) 。抗體過量稱為前帶(prezone) ，抗原地過量稱為後帶(postzone) 。在用免疫學方法測定抗原時 ，應使反應係統中有足夠的抗體量 ，否則測得的量會小於實際含量 ，甚至出現假陰性 。
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