操作步驟 :
一
、樣品采集
:
1
、食品樣品
:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行
。
2
、血液樣品
:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL
,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管
,立即混勻
。
3
、糞便樣品
:取糞便置於滅菌的收集管中送檢
。
4
、病灶部位樣品
:取發病部位新鮮滲出物
、粘液膿血送檢
。
一
、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意
:由於標準品濃度非常高
,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行
,千萬不能汙染樣品或本試劑盒的其他成分)
。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原
,本產品不提供活體樣品做陽性對照
,隻提供可以直接使用的 DN段作為陽性對照
。
2. 標記 6 個離心管
,分別為 7
,6
,5
,4
,3
,2
。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭
,下同)
。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照
,充分震蕩 1 分鍾
,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照
。放冰上待用
。
5. 換槍頭
,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)
,充分震蕩 1 分鍾
,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照
。放冰上待用
6. 換槍頭
,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中
,充分震蕩 1 分鍾
,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照
。放冰上待用
。
7. 重複上麵的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照
。放冰上待用
。