操作步驟 ：

1. 取出試劑盒 ，室溫（20-25℃）放置 30 分鍾 。
2. 分組 ：取出 96 孔板 ，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數 ，把剩餘的板條繼續冷藏處理 。分別設標準品組（6 個濃度） 、空白孔 、待測樣品組 。
注 ：為減少實驗誤差 ，保證準確性 ，建議設置複孔 。
3. 加樣 ：依照標準品的順序分別加入 100ul 的標準品溶液於空白微孔中 ；空白對照孔加入 100ul 的蒸餾水 ；其餘微孔中加入100ul 的待測樣本 。
4. 加酶標溶液 ：標準品組 、待測樣本組各孔中加入 50ul 的酶標溶液（空白對照孔除外） 。
5. 溫育 ：酶標板用封板紙密封後 ，放入濕盒內於 37℃恒溫孵育 1 小時 。
6. 洗板 ：用稀釋後的洗滌液注滿每孔 ，靜置 15-30s ，充分清洗酶標板 5 次 ，用吸水紙*拍幹 。
7. 顯色 ：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 後 ，再加入顯色劑 B 液 50ul 。
8. 終止 ：25-37℃下避光反應 10-15 分鍾 ，加入 50ul 終止液。
9. 讀板 ：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值 。

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