組成及試劑配製:

1 、酶標板：一塊（96孔）

2 、 標準品（凍幹品） ： 2瓶 ，請臨用前15分鍾內配製 。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml ，蓋好後室溫靜置大約10分鍾 ，同時反複顛倒/搓動以助溶解 ，其濃度為200 U/L ，然後做係列倍比稀釋（注 ：不要直接在板中進行倍比稀釋） ，分別配製成200 U/L ，100 U/L ，50 U/L ，25 U/L ，12.5 U/L ，6.25 U/L ，3.12 U/L ，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L 。如配製100 U/L標準品 ：取0.3ml （不要少於0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中 ，混勻即可 ，其餘濃度以此類推 。

3 、 樣品稀釋液 ：1×20ml 。

4 、 檢測稀釋液A ：1×10ml 。

5 、 檢測稀釋液B ：1×10ml 。

PCR反應的特異性決定因素為 ：

①引物與模板DNA特異正確的結合 ；

②堿基配對原則 ；

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性 ；

④靶基因的特異性與保守性 。

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