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小鼠甲基化DNA(MDNA )酶聯免疫操作步驟
點擊次數 :882 更新時間 :2020-01-08

操作步驟
1.標準品的稀釋 :本試劑盒提供原倍標準品一支 ,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋 。2.加樣 :分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑 ,其餘各步操作相同) 、標準孔 、待測樣品孔 。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl ,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl ,然後再加待測樣品10μl(樣品稀釋度為5倍) 。加樣將樣品加於酶標板孔底部 ,盡量不觸及孔壁 ,輕輕晃動混勻 。

3.溫育 :用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾 。   
4.配液 :將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用
5.洗滌 :小心揭掉封板膜 ,棄去液體 ,甩幹 ,每孔加滿洗滌液 ,靜置30秒後棄去 ,如此重複5次 ,拍幹 。
6.加酶 :每孔加入酶標試劑50μl ,空白孔除外 。 
7.溫育 :操作同3 。
8.洗滌 :操作同5 。
9.顯色 :每孔先加入顯色劑A50μl ,再加入顯色劑B50μl ,輕輕震蕩混勻 ,37℃避光顯色10分鍾.
10.終止 :每孔加終止液50μl ,終止反應(此時藍色立轉黃色) 。
11.測定 :以空白空調零 ,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 。 測定應在加終止液後15分鍾以內進行 。

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