相信對於一些新手實驗人員來說
,實驗做得不理想是難免的事
。這不
,就在昨天下午
,我公司就收到一客戶的谘詢
。這位客戶說道
:“初次用間接法做ELISA實驗
,做了幾次結果都沒有顯色
,原因在哪裏呢”
針對問題描述
,上海恒遠技術員分析出為何間接ELISA沒有顯色
,可能原因有這幾個方麵
:
1.包被原
:包括你的包被液有無問題
,有沒有配錯
。包被原一般加100微升
,37度2小時
;
2.封閉
:封閉液用的是否適合
?你說做了幾次都沒顯色
,空白孔也不顯嗎
?如果空白也無顏 色
,那封閉就沒有問題
。一般封閉是200微升每孔
,也可以滿孔封閉
3.一抗
:檢查你的一抗是否失效
。是否是在37度反應
4.二抗
:底物
,底物緩衝液……這些都要好好檢查
!
5.洗滌
:用PBST洗滌
,包被和封閉時洗板3次
;一抗二抗洗滌5次
,每次間隔3分鍾
。手工和機器洗滌沒什麽不同
,就是省力一些
。洗5次不會有負影響
,在一抗和二抗洗滌過程中,恰恰需要多洗幾次
,這樣有助於減少非特異性吸附
。
做任何實驗
,都不可能**
,老哥俱樂部能做的就是盡zui大的努力減少實驗誤差
。
GSK-3 Beta (CT) 內皮脂肪酶
GSK-3 Beta (NT) 內皮因子12受體抗體
GST tag/GSTM1 內皮抑素/內皮他丁抗體
GSTA3 內皮細胞特異性分子1抗體
GSTO1/glutathione S transferase Omega 1 內皮細胞受體蛋白激酶抗體
GstP1/GST class-pi 內皮細胞凝集素HL1抗體
GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1 內皮細胞的分化蛋白6抗體
GTPBP10/Claudin12 內皮素轉化酶2抗體
GTSE-1 內皮素轉化酶1抗體
GYG1 內皮素受體B抗體
GYG2 內皮素受體A抗體
GZMA 內皮素-1抗體(抗血清)