老哥俱乐部

    胎盘泌乳素Elisa试剂盒是基于经典酶联夹心技术原理
，只能用于研究用途
，不得用于医学诊断

。样品和标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应
；经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关

。
    1．确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目
。
    2．将倍比稀释的标准品各0.1ml依次加入一排7孔中，1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入

。
    3．酶标板加上盖，37℃反应90分钟。
    4．反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体
，再对着吸水纸拍几下
。洗涤2次
。
    5．将准备好的抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。
    6．0.01MTBS或0.01MPBS洗涤3次，每次浸泡1分钟左右。
    7．将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入
。37℃反应30分钟
。
    8．0.01MTBS或0.01MPBS洗涤5次，每次浸泡1-2分钟左右。
    9．按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液
，37℃避光反应，反应过程中
，要经常的观察
，当肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色
，后3-4孔差别不明显时，即可加入TMB终止液0.1ml/孔
。（显色反应zui长不要超过30分钟）。
    10．用酶标仪在450nm测定O.D.值
。
    11．根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度
。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍，其实际浓度应该×N
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