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如何選擇合適的定量PCR儀
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:929 更新時間
:2016-07-25
如何選擇合適的定量PCR儀
傳統的96孔板式定量PCR儀以美國應用生物係統公司(ABI)為代表
。傳統96孔板式定量PCR儀的優點是可容納的樣本量大而且無需特殊耗材
,可以采用傳統的96孔板甚至384孔板進行批量的定量反應
,但是缺點也顯而易見——溫度均一性不佳——平板固定加熱模塊的PCR溫度控製有邊緣效應——樣品槽上每個孔之間的溫度存在差異——也就是所謂位置效應(可參考生物通龍虎榜
:PCR儀的選擇一文),因此標準曲線的反應條件應難以做到與樣本*一致
,樣本和樣本之間的溫度控製也可能存在差異
,對於靈敏度*的定量PCR來說
,任何極微小的差異都會以指數級別的規模被放大
,不能不說是一種缺憾
。傳統反應板麵積大
,溫度控製的性
、升降溫速度也相對較慢
,因而反應速度也較慢
。96孔板定量PCR儀的熒光檢測分析係統
,由於96孔板上樣品孔的位置是固定的
,每個樣品孔距離光源和監測器的光程各不相同
,有可能對結果產生影響
。檢測在試管管底進行
,試管底的透光性和厚薄均一性都可能對結果產生影響
。MJ和Bio-Red公司的定量PCR儀也屬於這一類
。